MassPrep自动酶切程序操作标准（sop）

一 开机前检查：
1 检查仪器台面（DECK）上所有的实验材料（Labware）。
2 检查SystemWater 水桶的水位。
3 检查恒温循环水浴（Chiller）水箱的水位，并定期更换或填充Chiller 中的循环水。
4 倒掉废液桶中的废液。

二 开机步骤：
打开Chiller、Heater、仪器及计算机电源，进入WinPREP程序 ： 
1 仪器初始化
点击菜单：[Utilites]→[Setup]→[Instrument]→[Initialize]仪器进行初始化。
2 系统管路冲洗、除气泡
点击菜单：[Utilites]→[Diagnostics Test]→[Flush and Wash tips]；
放置Labware(washbowl+1Through)在仪器平台的G13位置，排液管接至废液桶，按提示执行程序：

Deck layout OK,
run test now。 √
Flush Wash Volumes
Enter the Flush Volume(vl): 3000
Enter the Wash Volume(vl) : 3000 
>start,仪器开始冲洗管路中的气泡，要多次冲洗直至管中*没有气泡。
3 执行自动酶切程序
点击菜单：[File]→[Open]；
打开所要执行的自动酶切操作文件：
按文件图示位置放置所需的Labware。（注意：盖子应放在96 well ABGENE PCR 上； 所有实验器皿应放入准确位置）， 按要求配置试剂，装入试剂盒（瓶）；
点击工具栏：[Execute Test]。弹出[Test Startup page]窗口, →点击[Reset Tip Boxes],（Lid on PCR(1-96) ,Tips=1），“Fill”为添满，“Empty”为清空， 

Name Based on file Location New/Used 
Lid on gel(1-96) Lid( on gel).rak G16 0/0
Lid on gel(97-192) Lid( on gel).rak E16 0/0
Lid on PCR(1-96) Lid( on PCR).rak C10 1/0
Lid on PCR(97-192) Lid( on PCR).rak A10 0/0
Lid on rest(1-96) Lid( on rest).rak C07 0/0
Lid on rest(97-192) Lid( on rest).rak A07 0/0
TiPS 1-96 20vl MBP disposable tips.rak C13 96/0
Tips 97-192 20vl MBP disposable tips.rak A13 96/0
Tips for li… 200vl MBP disposable tips.rak C16 96/0 
>OK
>Next
Heater Control Options
Manual Control 
Black Box Pow-R-Switch 
Packard Automated Heater Control √
>Next
Sample information
How many Coomassie-stained sample? (以8为单位输入你的样品数)
Position of first Coomassie-stained sample? 1
How many Silver-stained sample? (不做银染可忽略)
Position of first Silver-stained sample? (不做银染可忽略) 
>Next
Method Options
Remove excess liquid? √
Include Coomassie de-stain? √
Include silver de-stain?
Include reduction and alkylation? √
Include wash-dehydrate steps? √
Number of extractions? 2
Dispose of used 20µl tips? √
>Next
MALDI Options
Used Lockmass?
Spot MALDI target? √
Spot target twice? √
On-target washing?
>Start，开始执行程序。
注意事项：
1． 为避免角蛋白和其它污染，在移动labware 、dispensable tips、试剂或样品时，请戴手套操作，在仪器运行过程中非仪器操作人员请远离仪器。
2． 整个操作过程中的水为除去气泡的去离子水。
3． 检查冷却循环仪是否打开和是否达到安全水位；检查系统液体的水平面是否达到标志线（1/2桶的体积）；检查废水桶的液面，及时排水；检查各种实际是否准确配置及正确放入位置。
4． 执行程序前，一定要对照所选执行程序检查所有Labware的位置是否正确
5． 盖子（lid）应放在96 well ABgene PCR （1-96）上。
6． 运行FlushLiq ，尽可能的去除系统中可能存在的气泡。
7． 在[Reset Tip Boxes]时，要确定盖子（lid）位置和枪头（Tips）数量与实际位置和数量相符
8． 在仪器运行过程中如有以外情况发生，请速按仪器正前方紧急停止按扭（红色）。
9． 在仪器关机不用时，请用仪器罩遮严以防止灰尘。
10． 在每次操作完成后请自觉登记，并保证操作台面的整洁。