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Dicer RNAi试剂盒进行RNAi分析的实验

时间:2016-6-22阅读:1041
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选择BLOCK-iT™ Dicer RNAi试剂盒,利用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)进行简单、快速的基因阻断,您不必再花费时间设计siRNA oligo序列及检测它们的效率,就可直接获得RANi结果。

功能基因阻断研究的简单、快速的方法

RNA干扰(RNAi)正在成为一种的技术之一,用于在功能分析试验中有效地阻断特异基因的表达。通过这种方法,利用长度为21-23个核苷酸的小干扰RNA(sirna)可以很容易地、特异地降解互补靶mRNA。

当前常用的用来在哺乳动物细胞中启动RNAi反应的方法包括以下几种:转染合成的siRNA寡核苷酸(siRNAoligonucleocides),体外转录后通过Dicer酶将长的双链RNA(dsRNA)切割成Diced siRNA (d-siRNA),或者导入能够表达siRNA的载体。在这些方法中,只有体外转录和切割(Dicing)能够形成d-siRNA 双链体的复杂池,继而经过转染进入细胞。这一过程可以很快产生结果,而无需再花费时间设计和检测多个序列,并确定哪一个将会导致显著的基因表达阻断。现在您可以通过BLOCK-iT™ Dicer RNAi 转染和BLOCK-iT™ Dicer RNAi TOPO®转录试剂盒简便、快速的获得所需要的RNAi的原始数据,方便地研究和选择模式系统中的目的基因。

BLOCK-iT™ Dicer试剂盒作用原理

BLOCK-iT™ Dicer反应的*步是构建dsRNA模板。您可以通过BLOCK-iT™ Dicer RNAi TOPO®转录试剂盒(包括在BLOCK-iT™ complete Dicer RNAi试剂盒中)很容易地得到转录本,而且转录本产量大,纯度高,能够直接用来作为BLOCK-iT™ Dicer反应的底物,用高活性的Dicer酶消化后,使用试剂盒中提供的柱子快速纯化zui终的d-siRNA,就可获得高纯度的d-siRNA库,并可以使用有口皆碑的Lipofectamine™ 2000转染试剂将它导入细胞。

利用BLOCK-iT? Dicer RNAi试剂盒进行RNAi分析

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