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大鼠超氧自由基(SOR)

阅读:756发布时间:2012-12-18

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大鼠超氧自由基(SOR) 操作步骤
1.   标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
90pg/ml  5 号标准品  150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
45pg/ml  4 号标准品  150µl 的5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
22.5 pg/ml  3 号标准品  150µl 的4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
11.25pg/ml  2 号标准品  150µl 的3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
5.625pg/ml  1 号标准品  150µl 的2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
 
 
2.   加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,
然后再加待测样品 10 µl(样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.   温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。      
4.   配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.   洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6.   加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。  
7.   温育:操作同 3。
8.   洗涤:操作同 5。
9.   显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.  终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.  测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。  测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。

大鼠超氧自由基(SOR) 注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间
控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值
大于标准品孔*孔的 OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计
算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10.  如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
大鼠超氧自由基(SOR) 保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月


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