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上海研盟生物科技有限公司
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阅读:692发布时间:2013-05-13
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鸡禽流感H5抗原(AIV-Hg)操作步骤
1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1
孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl 。然后在待测样品孔先
加样品稀释液 40μl ,然后再加待测样品 10μl 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不
触及孔壁,轻轻晃动混匀,
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育30 分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30秒后弃去,如此
重复5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50 μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
鸡禽流感H5抗原(AIV-Hg)保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
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