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牛血清白蛋白残留量测定法
点击次数：1827 发布时间：2013-8-20
本法系用酶联免疫法测定供试品中牛血清白蛋白（BSA）含量量，以判断供试品中BSA残残留量是否符合规定的检测方法。以牛血清白蛋白标准品为标准，采用直线回归方法计算供试品中牛血清白蛋白含量。
供试品溶液的制备 供试品如为冻干剂型，检测前应按标示量复溶后震荡混匀，室温静置30分钟，检测前应再次震荡混匀。供试品如为液体剂型可直接用于检测。采用试剂盒提供的供试品稀释液稀释供试品，供试品应至少进行两个稀释度测定，每个稀释度做双孔平行测定。测定BSA含量的容器具应，防止实验室中BSA污染。
干扰试验 制备溶液A（供试品溶液倍比稀释）、B（供试品溶液和30ng/ml的内控标准品等量混合）和C（30ng/ml的内控标准品倍比稀释）。其中，供试品溶液BSA含量高于试剂盒测定范围中点时，两倍稀释后制备溶液A和B。溶液A、B可倍比稀释测定，溶液C应多孔测定，并在试验间均匀添加。
测定法 按试剂盒说明书进行。试剂盒标准品的吸光度值（A值）、内控参考品测定值、标准品线性相关系数、双孔测定吸光度值（A值）均应在试剂盒要求范围内，试验有效。以试剂盒提供的标准品吸光度值（A值）和浓度制定标准曲线，根据供试品的A值计算供试品中BSA含量，按试剂盒说明书要求判定zui终结果。
供试品测定时，低稀释度A值明显低于高稀释度A值时可能存在HOOK效应或操作失误，需重试或调整稀释倍数进行检测。应用该试剂盒的供试品应进行干扰试验。干扰试验中B－A值应在C值测定的95％可信区间内。