阿利新蓝 PAS 染色液说明书
阿利新蓝 PAS 染色液【原理及作用】
阿利新蓝和 PAS 技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。这种 技术也常用作广泛检测黏蛋白的手段。该技术染色阴性,可明确断定该物质不是黏蛋白。
在大多数方法中,切片先经标准的阿利新蓝(pH 值为 2.5)染色,再使用 PAS 技术,阿利 新蓝可将唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成蓝色。PAS 技术可将中性黏蛋白染成深红/ 红紫色,同时将既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的组织和细胞染成深浅不同的紫色,这是由 于阿利新蓝与 Schiff 试剂结合并反应。上述染色常可出现在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白 的小肠杯状细胞中。
阿利新蓝 PAS 染色液【参考操作步骤】
1、二甲苯脱蜡,梯度酒精入至去离子水再水化。
2、试剂(A)染 30min。
3、流水冲洗 5 min,去离子水快速冲洗。
4、试剂(B)氧化染 5min。
5、流水冲洗 5 min。
6、试剂(C)15min。
7、流水冲洗 10min。
8、试剂(D)淡染细胞核。
9、流水冲洗 5-10min,适当返蓝。
10、流水冲洗 5min。
11、梯度酒精脱水,二甲苯透明,混合封片剂封片。
【结果】
糖原、中性黏蛋白、各种糖蛋白红紫色 酸性黏蛋白(硫黏蛋白和唾液黏蛋白)蓝色 蛋白多糖和透明质酸蓝色
含有中性黏蛋白和酸性黏蛋白的细胞或组织可染成不同程度的蓝紫色至紫色。
【贮存条件】 4℃,避光,密闭,12 个月
【注意事项】
1、苏木素淡染非常重要,目的是防止胞浆或黏蛋白着色而掩盖阿利新蓝的颜色。
2、研究表明,阿利新蓝-PAS 联合技术的染色顺序可影响zui终结果。 PAS 技术在阿利新 蓝染色之前时,中性黏蛋白和糖原可染成紫色。与此相反,阿利新蓝染色在 PAS 技术之前时, 则可将这些物质染成预期的红紫色。PAS 染色后,中性碳水化合物获得亲阿利新蓝能力的原 因不明。然而,有人认为,过碘酸氧化后形成的醛基可能与 Schiff 试剂中的亚硫酸盐反应 形成一个阴离子,再与随后的阿利新蓝结合。
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