可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态好与不好zui至关重要的考验。

很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺好的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。

在消化的过程中，你加入*后，所有细胞都在被*消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。。。呵呵。大家争取争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例）

具体操作

1）.首先不加*，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。

2）.然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面*消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对*的敏感度了。）

3）.吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的*润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的*消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉*与干净弹头里备用，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。（也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比。）

4）.然后把前面刚吸出来的*重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的*，如果你们那比较富裕的话，呵呵。继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉*，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（据实际情况把握）。