人普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)ELISA试剂盒(Import 96T)
中文简称:人普通急性淋巴细胞白血病抗原ELISA试剂盒 英文简称:(CALLA)ELISA KIT
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ELISA简介
人普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)ELISA试剂盒(Import 96T)敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断试剂盒。且拥有试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等特点。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。ELISA常用方法:双抗体夹心法测定。规格:96T/48T。试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%。保存条件及有效期:试剂盒保存:2-8℃,有效期:6个月。
ELISA试剂组成
1.抗原 在ELISA中应用的抗原要求有较高的特异性、亲和力和纯度。主要有3类,即自然抗原、人工合成抗原和基因重组抗原。
2.抗体 在ELISA中应用的抗体可分为多克隆抗体(多抗)和单克隆抗体(单抗)。多抗取白免疫动物的抗血清,制备较简单,但抗血清成分复杂,除含针对抗原(多个表位)的抗体外,还含有多种其他抗体,亲和力和特异性相对要低于单抗,且制备周期长,批间差异较大。
3.酶和底物 在ELISA中zui常用的酶为HRP和ALP
(1)HRP:是一种糖蛋白,含糖量约18%,分子量为44kD,在蔬菜作物辣根中含量很高。(2)ALP:是一种磷酸酯的水解酶,用做示踪酶的ALP活性应在l 000U/mg以上。
4.固相载体 固相载体是ELISA中用以分离结合标记物和游离标记物的主要手段,应与各种免疫活性物质有良好的结合性能并且不改变其免疫活性。常用的固相载体有聚苯乙烯塑料和硝酸纤维素膜。
5.包被 将免疫活性物质(抗原或抗体)结合于固相载体上的过程称为包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纤维薄膜等;常用的方法有吸附法、化学交联法及亲和素-*间接包被法。
ELISA测定步骤
测定时一般需经过以下步骤:固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。ELISA操作较繁杂,操作不当将引起较大的误差。在操作中应注意以下5个方面。
1.随着病情的进展或由其他因素影响,某些抗体在机体内的含量发生大幅波动,因此有必要对标本进行预处理,例如对血清标本作适当稀释,或离心分离血脂等。间接法测定中,标本适当稀释还可降低非特异性反应。
2.加样一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加终止液。加标本时必须每份标本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶结合物、底物和终止液时则不需更换吸嘴。
3.在成批手工检测中,还应注意操作时差的影响。加样及混匀时间的差异,使抗原抗体反应和酶促反应时间不*,对竞争法及定量检测影响很大,不注意可能会导致错误结果或定量不准。
4.洗涤是ELISA操作过程中决定实验成败的一个关键步骤。目的是除去未结合的免疫反应物,终止抗原抗体反应,除去标本中与反应无关的成分、游离的酶标物以及反应过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手工洗板,前者洗涤质量较好,各反应孔洗涤效果均一,批内、批间差异小,手工洗板应注意控制各孔洗涤效果,差异不宜太大。
5.准确判定结果须使用ELISA测读仪(酶标仪),比色法判读可选择单波长或双波长,根据反应液颜色的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反应孔的吸光度值(A值)。酶标仪具有良好的重复性。
ELISA试剂展示
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