大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒(elisa kit)
中文简称:大鼠8羟基脱氧鸟苷ELISA试剂盒 英文简称:(8-OHdG)EELISA KIT
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大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒(elisa kit)敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断试剂盒。且拥有试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等特点。使用方法一:96T ELISA试剂盒(标本90个,标准曲线6个|标本94个,标准对照2个)。 使用方法二:48T ELISA试剂盒(标本42个,标准曲线6个|标本47个,标准对照1个)。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。ELISA常用方法:双抗体夹心法测定。规格:96T/48T。试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%。保存条件及有效期:试剂盒保存:2-8℃,有效期:6个月。
ELISA实验中zui可能出现问题
一、 所有孔未显色 1、分析原因: 1) 微孔加入抗体后,洗板不*,微孔中存在游离的抗体。 2) 用错试剂。 3) 在操作中忘记加酶或抗体。 2、解决办法: 1) 检查洗板器械,比如洗板机管道是否堵塞、洗液是否用完。 2) 在加样前,要看清瓶签。 3) 严格按说明书操作步骤进行实验,确保每步都到位。 二、 所有孔显色偏低 1、分析原因: 1) 微孔加入抗体后,洗板不*,微孔中存在游离的抗体。 2) 洗板不干净。 3) 抗体污染了酶结合物等其它试剂。 4) 温度没达到要求。 5) 每孔加入的试剂量低于说明书要求量。 2、解决办法: 1) 手工加蒸馏水洗板时,要避免吸头接触微孔,常更换新的蒸馏水。 2) 洗板时要确保每孔都注满蒸馏水(约400ul),且至少洗板五次。 3) 严格按说明书要求操作,每次取样要更换吸头。 4) 控制孵育温度在25℃。 5) 加样器吸头安放牢固避免吸样不足,加样时务必将吸头内液体打尽。
ELISA测定步骤
大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒(elisa kit)测定时一般需经过以下步骤:固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果。ELISA操作较繁杂,操作不当将引起较大的误差。在操作中应注意以下5个方面。
1.随着病情的进展或由其他因素影响,某些抗体在机体内的含量发生大幅波动,因此有必要对标本进行预处理,例如对血清标本作适当稀释,或离心分离血脂等。间接法测定中,标本适当稀释还可降低非特异性反应。
2.加样一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加终止液。加标本时必须每份标本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶结合物、底物和终止液时则不需更换吸嘴。
3.在成批手工检测中,还应注意操作时差的影响。加样及混匀时间的差异,使抗原抗体反应和酶促反应时间不*,对竞争法及定量检测影响很大,不注意可能会导致错误结果或定量不准。
4.洗涤是ELISA操作过程中决定实验成败的一个关键步骤。目的是除去未结合的免疫反应物,终止抗原抗体反应,除去标本中与反应无关的成分、游离的酶标物以及反应过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手工洗板,前者洗涤质量较好,各反应孔洗涤效果均一,批内、批间差异小,手工洗板应注意控制各孔洗涤效果,差异不宜太大。
5.准确判定结果须使用ELISA测读仪(酶标仪),比色法判读可选择单波长或双波长,根据反应液颜色的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反应孔的吸光度值(A值)。酶标仪具有良好的重复性。
ELISA试剂展示
大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒(elisa kit)
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