中英文名称:鸡免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 ;Chicken immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit产品性状:试剂(瓶装)
科研范畴:elisa试剂盒系列
产品用途:供科研单位,各大高校等用于科研实验.
产品储存:2-8°C
产品规格:48T/96T
使用注意事项:试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。不用的其它试剂应包装好或盖好。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
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鸡免疫球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒 实验时PCR-SSP分析实验原理和步骤PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3´端*个碱基分别与各等位基因的特异性碱基相匹配的序列特异性引物,在PCR 反应过程中,只有引物3´端*个碱基与决定特定等位基因的碱基互补时才能实现DNA 片段的*复制,根据PCR 产物的有无进行等位基因的分型。
[实验方法]1.PCR 扩增 PCR 反应体系为20μl(2 个体系,分别为引物1 和引物2),含模板2μl(约50ng),引物各1.5μl,dNTP1.6μl(0.4mM),10×Buffer 缓冲液2μl,Taq 酶1.0U,加双蒸水至20.0μl;PCR 反应条件为94℃4min,94℃1.5min/52℃2.0min/72℃2.0min,30 个循环。2.PCR 扩增产物的检测 取PCR 扩增产物2μl,6%聚丙烯酰胺凝胶电泳(T=6%,C=3.3%,凝胶规格为82mm×64mm×0.75mm)。电极缓冲液为1×TBE。将加有1/5 体积上样缓冲液的酶切产物电泳,220 v 电压,电泳2-3h。银染显色[结果判定]根据电泳谱带的有无判定等位基因型别,仅有1 个体系检测到谱带者为相应特异性引物对应型(M 或N),2 个体系均检测到谱带者为MN 型。[实验讨论]1.注意事项 ①如引物结合序列存在碱基变异可能无扩增产物,导致错误判型;②在对照样品分型准确的基础上才能判定结果。2.方法评价 该方法操作简单,引物设计与实验的复性条件要求较高。
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