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犬甲型肝炎病毒IgG抗体(HAV-IgG)ELISA检测试剂盒

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犬甲型肝炎病毒IgG抗体(HAV-IgGELISA检测试剂盒

使用说明书

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被犬甲型肝炎病毒IgG抗体HAV-IgG)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的犬甲型肝炎病毒IgG抗体HAV-IgG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度OD 值),计算样品浓度。


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样品收集、处理及保存方法

1.  血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.  血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。

3.  细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.  组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。

5.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8

12孔×4

标准品(2400IU/L

0.6mL

0.6mL

按说明书进行稀释

标准品稀释液

6mL

3mL

*

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

说明书

1

1

自封袋

1

1

注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:2400120060030015075IU/L.

 

4.  随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37水浴锅或恒温箱温育60min

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物AB50μL37避光孵育15min

7.  每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。 


  上海裕平生物科技有限公司主要经营各种品牌档次的ELISA试剂盒,*,售后服务完善。并提供免费代检测。服务于高校及免疫学科研单位。技术人员更好的为您服务。
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操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL

3.  待测样本孔先加待测样本10μL,再加*40μL

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