北京方程生物科技有限公司

做PCR试验前需要的准备

时间:2013-11-5阅读:373
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北京方程生物公司承接elisa实验,PCR实验及相关实验。

  1. 试验耗材(1.5mlEppendorf管,0.5 mlEppendorf管,1ml吸头,200ul吸头,10 ul吸头)预先用0.1%DEPC水(取2ml DEPC加2000 ml水,摇匀,过夜,灭菌;DEPC是致癌剂,固须戴手套操作)浸泡过夜.然后用灭菌水淋洗,并于100℃烤干.

  2. 玻璃器具蒸馏水淋洗数次,150℃烘烤,4小时以上

  3. 一次性96孔联体PCR反应板及配套的透明粘模

  4. 75%乙醇的配置(1倍的DEPC处理水加3倍的无水乙醇)预冷.

  5. Trizol(预冷) (内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,抑制细胞释放出的核酸酶)

  6. 蒸馏水, DEPC处理水

  7. 氯仿(预冷) (能将胞膜及胞壁部分结构溶解使胞内各种物资释放出,并抑制细胞释放出的核酸酶)

  8. 异丙醇(预冷) (异丙醇选择性沉淀DNA而与在溶液中的RNA分离)

  9. PCR试验所需试剂盒组成(5×逆转录buffer,dNTPs,MMLV,DEPC处理水, 5×定量PCRbuffer,Taq酶, ddH2O,上游引物F,下游引物R,TaqMan probe)

  10. 试验前将生物安全柜UV及标本处理间UV打开照射30分钟.

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