兔抗人碱性成纤维细胞生长因子多克隆抗体操作步骤

兔抗人碱性成纤维细胞生长因子多克隆抗体操作步骤：

1、 十二烷基硫#钠SDS溶液:0%（w/v）0.gSDS，mlH2O去离子水配制，室温保存。

2、 分离胶缓冲液:.5mmol/L Tris-HCl （pH8.8）:8.5gTris和48mlmol/L HCl 混合，加水稀释到，b-FGFWestern  

3、 浓缩胶缓冲液:0.5mmol/L Tris-HCl （pH6.8）:6.05gTris溶于40mlH2O中，用约48ml mol/L HCl调至pH6.8加水稀释到00ml终体积。过滤后40C保存。这两种缓冲液必须使用Tris碱制备，再用HCL调节PH值，而不用 Tris.CL。

4、 TEMED原溶液N，N，N’N’四甲基乙二胺催化过硫#铵形成自由基而加速两种丙稀酰胺的聚合。

5、 SDS- PAGE加样缓冲液:pH6.8 0.5mol/L Tris缓冲液8ml，甘油6.4ml，0%SDS 2.8ml，巯基乙醇3.2ml，0.05%溴酚蓝.6ml，H2O 32ml混匀备用。按:或:2比例与蛋白质样品混合，在沸水终煮3min混匀后再上样，一般为20-25ul，总蛋白量00μg。

6、 Tris-甘氨#电泳缓冲液:30.3gTris，88g甘氨#，0gSDS，用蒸馏水溶解至000ml，得0.25mol/L Tris-.92mol/L甘氨#电极缓冲液。临用前稀释0倍。

7、 转移缓冲液：配制L转移缓冲液，需称取2.9g甘氨#、5.8gTris碱、0.37g SDS，并加入200ml甲醇，加水至总量L。

8、 丽春红染液储存液：丽春红S 2g 三#乙#30g 磺基水杨# 30g 加水至00ml 用时上述储存液稀释0倍即成丽春红S使用液。使用后应予以废弃。