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细胞适应无血清培养基过程的注意事项研究

时间:2014/7/31阅读:749
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细胞适应无血清培养基过程的注意事项研究

  在细胞适应无血清培养基过程中,不要让细胞生长过度。这将增加选择亚群的可能性。需要注意,与有血清培养基相比,大部分SFM包含非常少的蛋白质,因而更易于受外界因素的影响。

  细胞培养适应替代血清:培养基许多细胞利用连续适应方法能很好的适应,用包含FBS的的培养基和包含有替代血清的培养基∶(v∶v)的混合培养基培养细胞。通过下列的混合培养基的方式,连续几代减少当前培养基的量:∶2,∶4,∶6和00%替代培养基。每次适应改变血清比例时,传代细胞2到3次。

  培养可以直接从FBS转换到替代血清。一开始就使用相同于FBS的浓度的替代物或血清,生长的延迟可能会发生,4允许进行2到3次的传代,使生长率恢复到以前的水平。

  特别需要强调的是:培养基配制无血清培养液必须使用高质量的水,如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水。因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保护细胞的大分子,既便水中的有毒物质含量甚微,也可能对细胞产生致死性损害。这是无血清培养能否成功的关键因素之一。

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