培养基的pH如何依据成分与条件考虑

培养基的pH如何依据成分与条件考虑

    细菌、放线菌的生长繁殖对pH一般要求偏碱，霉菌和酵母菌要求偏酸。因此，分离培养基的pH应该调节到被分离微生物要求范围。这不仅有利于自身生长，也可排除一部分不需要的菌类。例如，分离柠檬酸产生菌的黑曲霉，就是利用调节培养基的酸碱度获得成功的。其分离方法是：取红芋粉醪20%、柠檬酸0%～20%配成培养液，调节pH2.0～2.5，以一定量的培养基和土样均匀混合，用毛细吸管点种在平皿内事先覆盖的无菌滤纸上（2～3层），于30℃培养，这样可以分离到产生柠檬酸的黑曲霉。

    分离碱性蛋白酶和碱性脂肪酶产生菌时，可以把培养基调到pH9～，在此范围内不宜生长的微生物被抑制，这对分离培养基本身起到浓缩作用。大多数水解酶的生长zui适pH基本相近，而酶的作用pH未必与产酶pH相同。

    培养基的pH要结合营养成分和培养条件来考虑。因为微生物在生长繁殖过程中，由于代谢作用会产生酸性或碱性产物，pH发生变化，微生物生长受到抑制。一般培养基中碳氮比（C/N）高者，培养后倾向于酸性，反之则倾向于碱性。无机盐的性质也会影响pH变化，（NH4）2SO4是生理酸性无机氮源，其中NH4+被菌体利用，留下SO42—，培养液变成酸性。而NaNO3是生理碱性氮源，其中NO3—被菌体分解利用后，剩余Na+，使培养液变成碱性。如发酵过程缺氧，则代谢向有机酸合成方向进行，pH下降。为了维持培养基的ph，一般要加磷酸盐，如K2HPO4、KH2PO4，使培养基具有一定的缓冲能力。如果培养液中的酸碱变化很大，磷酸盐的缓冲容量不足以调节pH变化，则可适当加入碳酸钙，以不断中和菌体代谢过程中产生的酸类，使培养基的pH能保持在恒定的范围内。此外，在分离霉菌时，加几滴乳酸不仅可以维持一定酸碱度，而且可以抑制细菌的生长。

250克 Bacto-Agar 培养基细菌琼脂粉 BR
00克 Bile powder of cow 牛胆汁粉 BR，40%
00克 Bile powder of pig 猪胆汁粉 BR
250克 OX Bile dihydrate purified 脱氢牛胆粉 BR
250克 Beef extract powder 小牛浸膏粉 BR
500克 Meat extracts beef 牛肉膏 BR
250克 Yeast extract powder 酵母粉 BR
500克
500克 Yeast extract 酵母浸膏 BR
25克 Bile salt No. 3 3号胆盐 BR，90%
25克 Bile salt No. 5 5号胆盐 BR，70%
25克 Bile salt No.7 7号胆盐 BR
25克 Bile salt from sheep 羊胆盐 BR
25克 Bile salt from ox 牛胆盐 BR，60%
公斤
25克 Bile salt from pig 培养基猪胆盐 BR，65%
公斤
25克 Bile salt from poultry 禽胆盐 BR
250克 Casein acid hydrolysate 酸水解酪蛋白 BR
公斤
00克 Casamino acid 酪蛋白水解物 BR