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非标记抗体酶法——酶桥法

时间:2015/7/15阅读:1669
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 ?  首先用酶免疫动物,制备效价高、特异性强的抗酶抗体;
?  以二抗作桥,将抗酶抗体联结在一抗上;
?  再将酶结合在抗酶抗体上,经显色显示抗原的分布
–  优点:任何抗体均未被酶标记。酶是通过免疫学原理与酶抗体结合的。避免了共价连接对抗体和酶活性的损害,提高了方法的敏感性,而且节省一抗的用量。但抗酶抗体不易纯化。

几点说明
?  一抗(假设来自种属A)的稀释度可大些,使抗体的两个Fab段均与组织抗原结合。
?  二抗——桥抗体(抗种属A的IgG抗体)应过量,使其Fab段一个与一抗结合,另一个则游离。
?  因抗酶抗体与一抗均系种属A IgG,具有相同的抗原性,所以桥抗体游离的Fab能与抗酶抗体结合,起桥作用,将其连接在与组织抗原结合的一抗上。

非标记抗体酶法——PAP法
?   与酶桥法相似,不同的是,PAP法将酶桥法的第3、4步并为步,用PAP复合物代替;
?  PAP是离体制备的复合物(HRP--抗HRP)。
?  显色与酶桥法相同,PAP复合物中的过氧化物酶催化底物水解,形成不溶性终产物。

PAP法评价
?  PAP法比直接法、间接法、酶桥法更敏感。特别适用于石蜡切片中微量抗原和抗原性减弱抗原的检测。
–  缺点:步骤较多,时间较长,不适用于临床常规检查。
?  由于常做石蜡切片,故可用于回顾性研究。

英文名称 Homo sapiens (Human) 钙调素(RGN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Homo sapiens (Human) 钙调素(CAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Homo sapiens (Human) 钙调宁蛋白2(CNN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Homo sapiens (Human) 钙调宁蛋白(CNN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
抗体英文名称 Homo sapiens (Human) 钙调磷酸酶(CaN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Rattus norvegicus (Rat) 钙调磷酸酶(CaN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Homo sapiens (Human) 钙调结合蛋白(CALD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T
英文名称 Rattus norvegicus (Rat) 钙调结合蛋白(CALD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) 规格: 48T/96T

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