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细胞污染的清除

时间:2016/9/14阅读:880
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细胞污染的清除
培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之;有细胞株留存的或可购置的,可在寻找原因后*消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采取以下办法清除。
(一)使用抗生素
抗生素对杀灭细菌较有效。联合用药比单独用药效果好。预防用药比污染后再用药效果好。预防用药一般用双抗生素(00u/mL加00μg/mL),污染后清除用药需采用大于常用量5~0倍的冲洗法,于加药后作用24~48小时,再换常规培养液。此法在污染早期可能有效。所用抗生素品种除、外,还可用、、多粘菌素、四环素、等。常用400~800μg/mL或200μg/mL四环素处理,每隔2~3日换液次,传~2代进行治疗。近年来有报道,4-氟,2-羟基喹啉(Ciprofloxacin,Cip)、截耳素衍生物(Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-和四环素衍生物(BM-2)等三种抗生素单用或合用对杀灭支原体有效。这三种抗生素均用配成250X浓缩液,-20℃保存备用,使用浓度Cip为0μg/mL,BM-为0μg/mL,BM-2为5μg/mL。使用时先吸除污染的培养液,加入含BM-的RPMI640培养液,3天后再吸除培养液,加入含BM-2的RPMI640培养液,培养4天,如此连续3个轮次,直至用33258荧光染色镜检证明已清除支原体后,再加正常培养液培养传代3-4次。

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