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国产ELISA试剂盒克隆化的方法软琼脂平板法分析

时间:2017/2/7阅读:849
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国产ELISA试剂盒克隆化的方法软琼脂平板法分析

.国产ELISA试剂盒配2.5%的琼脂糖30ml,水浴溶化后,移入45℃水浴中。

2.将7ml*DMEM液和3ml0倍浓度的DMEM液混合,置45℃水浴预热。

3.将琼脂糖与DMEM液混合,即为含0.5%琼脂糖的*DMEM液,并加75×08脾细胞。

4.每块平皿加0ml,于室温中凝固。

5.DMEM中的细胞与DMEM—琼脂:混合,将细胞琼脂混合物2ml铺于凝固的平板上,使其全部覆盖。

6.放入CO2箱饱和湿度,37℃培养0天。

7.用PBS配制0.6%琼脂糖,于沸水浴溶解后,置45℃,在保温情况下取一试管,国产ELISA试剂盒迅速加入0.ml25%羊红血球,0.2ml豚鼠补体,2.7ml0.6%琼脂糖。

8.用3ml琼脂糖—羊红血球混合液覆盖克隆。于37℃CO2箱孵育h~2h。从克隆上部溶解羊红血球的溶血范围,可筛选抗羊红血球Ig。

 

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