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各种ELISA试剂盒配置方法汇总

时间:2020/1/2阅读:691
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各种ELISA试剂盒配置方法汇总如下:() ELISA试验停止液(2) ELISA底物缓冲液(3) ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液(4)ELISA试验包被缓冲液(5)ELISA试验洗刷缓冲液(6)ELISA试验稀释液(7)规范品稀释液。

() ELISA试验停止液(2M H2SO4):
蒸馏水78.3ml,逐滴参加浓硫酸(98%)2.7ml。

(2) ELISA底物缓冲液(PH5.0磷酸棗柠檬酸):
0.2M Na2HPO4(28.4克/L)              25.7ml
0.M 柠檬酸(9.2克/L) 24.3ml
加蒸馏水50ml。

(3) ELISA试验包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):
NaHCO3    .59克
NaHCO3 2.93克
加蒸馏水至000ml。

(4) ELISA试验TMB(四甲基联苯胺)运用液:
TMB(0mg/5ml无水乙醇)   0.5ml
底物缓冲液(PH5.5)   0ml
0.75%H2O2                           32μl

(5) ELISA试验洗刷缓冲液(PH7.4 PBS):0.5M
KH2PO4   0.2克
Na2HPO4·2H2O 2.9克
NaCl   8.0克
KCl 0.2克
Tween-20 0.05%  0.5ml
加蒸馏水至000ml。

(6)规范品稀释液:
PBS L配方pH7.2-7.4.浓度0.0mol/L:
L酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,
L酸氢二钠(Na2HPO4):.42g,
氯化钠(NaCl):8g,
KCl 0.2g,加去离子水约800mL充分拌和溶解,然后参加浓盐酸或许氢氧化钠调pH至7.2-7.4,后定容到L,浓度为0mmol/L。

(7) ELISA试验稀释液:
牛血清白蛋白(BSA) 0.克
加洗刷缓冲液至00ml
或以羊血清、兔血清等血清与洗刷液配成5~0%运用。

值得一提的是有的封闭液中含有脱脂奶粉,不适合保存。
为了保证ELISA试验的准确性,试验操作中参加的缓冲液和各组分一定要准确,将洗刷液参加酶标板中的时候避免参加的试剂混入别的一个酶标孔,谨防交叉污染。

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