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蜜蜂球囊菌PCR检测试剂盒实验方法步骤

时间:2020/11/18阅读:695
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今天,我司技能专员为您解析蜜蜂球囊菌PCR检测试剂盒实验方法步骤

方法
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
0×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物(0pM)                 
2 μl     引物2(0pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
μl     DNA模板(50ng-μg/μl) 
μl      加ddH2O至 50 μl 
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用00μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-0μl电泳检测。
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