小鼠肺泡上皮细胞培养方法

 小鼠肺泡上皮细胞培养方法：

、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗-2次，加入mL 0.25%（T25瓶）
②-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

A2780/TAXOL人卵巢癌耐药株
LOVO/ADR人结肠癌耐药株
HCT-8/VCR人结肠癌长春新碱耐药细胞株
PATU8988/FU人胰腺癌氟耐药株
Hela/TAXOL人宫颈癌耐药细胞株
Bxpc3/DDP人胰腺肿瘤耐药株
Hela/DDP人宫颈癌耐药株
CNE2/DDP人鼻咽癌耐药株
A375/DDP人恶性黑色素瘤耐药株
HT-29/DDP人结直肠腺癌耐药株
SMMC772/DDP人肝癌耐药株
SK-MES-/DDP人肺鳞癌耐药株
T-24/DDP人膀胱移行细胞癌耐细胞株
A549/DDP人肺癌耐药株
SGC790/DDP人胃癌耐药株
K562/ADR人白血病耐药株
A549/TAXOL人肺癌耐药株
MCF7/Taxol人乳腺癌耐药株
SMMC-772/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐药株
Huh-7/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐药株
A549/耐药株人肺癌耐药株
SGC790/V人胃癌长春新碱耐药
A2780/V人卵巢癌长春新碱耐药株
HCT8/V人结肠癌长春新碱耐药株
HL-60/Adr人白血病耐药株
K562/Adr人白血病耐药株
A2780/Adr人卵巢癌耐药株