乙醛脱氢酶（ALDH）测定步骤

乙醛脱氢酶（ALDH）测定步骤：

、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至600nm，蒸馏水调零。

2、样本测定

（）试剂四于37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）孵育5min。

（2）在微量石英比色皿或96孔板中加入0μL样本、200μL试剂四和40μL试剂五，混匀，记录600nm处20s时吸光值A和min20s后的吸光值A2，计算ΔA=A-A2。

NOX 活力单位的计算

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

、血清（浆）NOX活力的计算:

单位的定义：每mL血清（浆）在每mL反应体系中每分钟A600变化0.0定义为一个酶活力单位。

NOX（U/mL）＝ΔA×V反总÷V样÷0.0÷T=2500×ΔA

2、组织、细菌或细胞中NOX活力的计算:

（）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白在每mL反应体系中每分钟A600变化0.0定义为一个酶活力单位。

NOX（U/mg prot）=ΔA×V反总÷（V样×Cpr）÷0.0÷T=2500×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织在每mL反应体系中每分钟A600变化0.0定义为一个酶活力单位。

NOX（U/g鲜重）=ΔA×V反总÷(W×V样÷V样总)÷0.0÷T=505×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每万个细菌或细胞在每mL反应体系中每分钟A600变化0.0定义为一个酶活力单位。

NOX（U/04cell）=ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.0÷T=.0×ΔA

V 反总：反应体系总体积，0.25mL；V样：加入样本体积，0.0mL；V样总：加入提取液体积，0.202mL；T：反应时间，min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量；500：细胞或细菌总数，500万。