,25二羟基检测试剂盒操作步骤

,25二羟基检测试剂盒操作步骤：

. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔0孔，在di一、第二孔中分别加标准品00μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取00μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为80 ng/L，20 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，5 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟.

0. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后5分钟。

人基质细胞衍生因子(SDF-)酶联免疫吸附测定试剂盒

人B-淋巴细胞趋化因子(BLC)酶联免疫吸附测定试剂盒 

人趋化因子CXC配体6(CXCL6)酶联免疫吸附测定试剂盒

人胱抑素C(Cys-C)酶联免疫吸附测定试剂盒

人(Cyt-C)酶联免疫吸附测定试剂盒

人Dickkopf相关蛋白 (DKK)酶联免疫吸附测定试剂盒

人二肽基肽酶IV(DPP4)酶联免疫吸附测定试剂盒

人表皮生长因子(EGF)酶联免疫吸附测定试剂盒

人表皮生长因子受体(EGFR)酶联免疫吸附测定试剂盒

人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)酶联免疫吸附测定试剂盒 

人内皮糖蛋白(ENG)酶联免疫吸附测定试剂盒

人内皮抑制素(ES)酶联免疫吸附测定试剂盒

人内皮素(ET-)酶联免疫吸附测定试剂盒

人内皮细胞蛋白C受体(EPCR)酶联免疫吸附测定试剂盒

人促红细胞生成素(EPO)酶联免疫吸附测定试剂盒

人凋亡相关因子(FAS/CD95)酶联免疫吸附测定试剂盒 

人凋亡相关因子配体(FASL/TNFSF6)酶联免疫吸附测定试剂盒 

人脂肪酸结合蛋白(FABP)酶联免疫吸附测定试剂盒

人甲胎蛋白(αFP)酶联免疫吸附测定试剂盒 

人酸性成纤维细胞生长因子(AFGF/FGF)酶联免疫吸附测定试剂盒

人氨肽酶(AAP)酶联免疫吸附测定试剂盒

人成纤维细胞生长因子9(FGF9)酶联免疫吸附测定试剂盒