大鼠促卵泡激素（FSH）试剂盒说明书

大鼠促卵泡激素（FSH）试剂盒说明书

使用目的：
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中促卵泡激素（FSH）含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠促卵泡激素（FSH）水平。用纯化的大鼠促卵泡激素（FSH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入促卵泡激素（FSH），再与HRP标记的促卵泡激素（FSH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的促卵泡激素（FSH）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠促卵泡激素（FSH）浓度。 
试剂盒组成 
30倍浓缩洗涤液 20ml×瓶 7 终止液 6ml×瓶
2 酶标试剂 6ml×瓶 8 标准品（48 IU/L） 0.5ml×瓶
3 酶标包被板 2孔×8条 9 标准品稀释液 .5ml×瓶
4 样品稀释液 6ml×瓶 0 说明书 份
5 显色剂A液 6ml×瓶 封板膜 2张 
6 显色剂B液 6ml×/瓶 2 密封袋 个
elisa试剂盒标本要求 
．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
24 IU/L 5号标准品 50μl的原倍标准品加入50μl标准品稀释液
2 IU/L 4号标准品 50μl的5号标准品加入50μl标准品稀释液
6 IU/L 3号标准品 50μl的4号标准品加入50μl标准品稀释液
3 IU/L 2号标准品 50μl的3号标准品加入50μl标准品稀释液
.5 IU/L 号标准品 50μl的2号标准品加入50μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟.
0. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后5分钟以内进行。