奥曲肽（Octreotide）酶联免疫分析ELISA试剂盒仅供研究使用

1 使用目的
本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织（如鸡、牛肉和猪肉），鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中奥曲肽（Octreotide）残留的定量检测。
2 实验原理：
本试剂盒采用竞争ELISA方法，在微孔板包被有奥曲肽（Octreotide）偶联抗原，加入奥曲肽（Octreotide）标准品或样品，游离奥曲肽（Octreotide）与微孔条上预包被的奥曲肽（Octreotide）偶联抗原互相竞争抗奥曲肽（Octreotide）抗体酶标记物，用TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在450nm波长下进行检测，吸光值与样品中奥曲肽（Octreotide）含量成反比，通过标准曲线计算样品中奥曲肽（Octreotide）的含量。
3 试剂盒组成 ：
3.1 预包被的奥曲肽（Octreotide）偶联抗原的可拆酶标板：1块（12孔×8条）。
3.2奥曲肽（Octreotide）标准品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0ug/ml, 4 ug/ml,12 ug/ml,36 ug/ml,108 ug/ml,324 ug/ml
3.3抗奥曲肽（Octreotide）抗体酶结合物：1瓶（6ml）。
3.4显色液A：1瓶（6ml）。
3.5显色液B：1瓶（6ml）。
3.6终止液：1瓶（6ml），2M硫酸。
3.7*：1瓶（10×, 6ml），用于样品稀释用。
3.8浓缩洗涤液：1瓶（20×，20ml），用于洗板。
3.9说明书一份。
4 需要而未提供的材料
4.1 设备
4.1.1波长450nm酶标仪。
4.1.2粉碎机。
4.1.3量筒。
4.1.4振荡器。
4.1.5漏斗。
4.1.6Whatman 或相当的滤纸。
4.1.7微量移液器。
4.2 试剂
4.2.1去离子水或蒸馏水。
4.2.2 甲醇。
5 贮存
5.1 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻
5.2 未用完的微孔板应该密封干燥保存
6 注意事项
6.1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
6.2 不要使用过期试剂盒。
6.3 试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（25±2℃），建议至少回温2小时。
6.4 标准品中含有奥曲肽（Octreotide），使用时应特别注意，操作时应带手套。
6.5 终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。
6.6 不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。
6.7 不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。
6.8 稀释样本时必须用本试剂盒中的*，否则会影响实验结果
6.9 混合试剂时应避免起泡。
7 工作液准备
7.1奥曲肽（Octreotide）标准品溶液：0ug/ml, 4 ug/ml,12 ug/ml,36 ug/ml,108 ug/ml,324 ug/ml
7.2 浓缩洗涤液：用蒸馏水按1:20（1+19）稀释备用
7.3 *：备用
7.3 显色剂：已备用，避免光线直照
7.4 反应终止液：已备用
8 样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）
8.1取10g粉碎的样品，加 20ml 70%甲醇溶液
8.2强力振荡3分钟
8.3用Whatman 滤纸过滤
8.4取100µl处理后的样品，加入400µl*
8.5取50μl稀释液进行分析（稀释倍数10）
动物组织前处理
8.6准确称取1±0.05 g匀浆后的组织样品到50 ml的聚苯乙烯离心管中；加入3ml乙腈--丙酮提取溶液，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心5min
8.7取上清液0.8ml在50℃氮气流下吹干
8.8加入2mL1×样品稀释液Ⅰ, 750rpm涡旋20s
8.9取100ml用于分析
饲料前处理方法
8.10准确称取1±0.05 g粉碎饲料样品到50 ml的聚苯乙烯离心管中；加入4ml乙腈，1ml丙酮，2000rpm剧烈震荡20s后4000r/min以上离心3min
8.11取上清液0.7ml在50℃氮气流下吹干
8.12加入1mL1×样品稀释液Ⅰ,涡旋20s，取出100ml加到900ml 1×样品稀释液Ⅰ，混匀后取100?l用于分析
牛奶前处理方法
8.13取1 ml牛奶样品到2 ml离心管中；用 1×样品稀释液Ⅱ稀释30倍，混匀后取100?l用于分析
奶粉前处理方法
8.14准确称取0.3g奶粉样品到7 ml的聚苯乙烯离心管中；加入2ml 1×样品稀释液Ⅲ，2 ml正己烷，震荡混匀
8.154000r/min以上离心5min，去除有机层和中间层，取下层溶液100ml到300ml 1×样品稀释液Ⅲ
8.16混匀后取100ml用于分析