实验原理
        碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时，共价闭合环状质粒DNA的两条互补链仍保持在一起，因此复性迅速而准确，在而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已*分开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕形成网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
实验材料
1.葡萄糖 2.三羟甲基氨基甲烷（Tris）
3.乙二胺四乙酸（EDTA） 4.氢氧化钠
5.十二烷基硫酸钠（SDS） 6.乙酸钾
7.冰乙酸 8.氯仿
9.乙醇 10.胰RNA酶
11.氨苄* 12.蔗糖
13.溴酚蓝 14.酚
15.β巯基乙醇 16.盐酸
17.含pUC18质粒的大肠杆菌
实验步骤
提取质粒
1．将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中，接入含质粒的大肠杆菌，37℃振荡培养过夜。
2．取1.5ml培养物倒入微量离心管中，4000rpm，离心2min。
3．吸去培养液，使细胞沉淀尽可能干燥。
4．将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中，充分混匀，室温放置10 min。
5．加200μl溶液Ⅱ（新鲜配制），混匀内容物，将离心管放冰上5 min。
6．加入150μl溶液Ⅲ（冰上预冷），盖紧管口，颠倒数次使混匀。
7．1200rpm，离心15 min，将上清转至另一离心管中。
8．向上清中加入等体积酚：氯仿（去蛋白），反复混匀，12000rpm，离心5min,将上清转移到另一离心管中.
9.向上清加入2倍体积乙醇,混匀后,室温放置5-10min。12000rpm离心5min。倒去上清液，把离心管倒扣在吸水纸上，吸干液体。
10．用1ml70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀，振荡并离心，倒去上清液，真空抽干或空气中干燥。
11．加50μl TE缓冲液，其中含有20μg/ml的胰RNA酶，使DNA*溶解，-20℃保存。