*的定量测定

一、原理：

*具有化学还原性。2，6-二氯酚靛酚钠盐水溶液呈蓝色，在酸性环境中为玫瑰色，当其被还原时，则脱色。根据其各自性质，利用2，6，-二氯酚靛酚在酸性环境中滴定有*的样品溶液。开始时，样品液中的*立即将滴入的2，6-二氯酚靛酚还原脱色，当样品液中维生素全部被氧化时，再滴入2，6-二氯酚靛酚就不再被还原脱色而呈玫瑰色。故当样品液用2，6-二氯酚靛酚标准液滴定时，溶液出现浅玫瑰色时表明样品液中的*全部被氧化，达到滴定终点。此时，记录滴定所消耗的2，6-二氯酚靛酚标准量，按下述计算出样品中还原型*的含量。

二、材料与试剂

绿豆芽、10%盐酸溶液

2，6-二氯酚靛酚溶液：称取0.21g*，0.26g2，6-二氯酚靛酚溶于250ml蒸馏水中，稀释至1000ml。过滤，装入棕色瓶内，置于冰箱中保存，不得超过3天。使用前用新配制的标准抗坏血酸溶液标定。取5ml标准抗坏血酸加入5ml偏磷酸-醋酸溶液。然后用2，6-二氯酚靛酚溶液的浓度，以每ml2,6-二氯酚靛酚溶液的浓度，以每毫升2，6-二氯酚靛酚溶液相当于抗坏血酸的mg数来表示。

标准抗坏血酸溶液：准确称取纯抗坏血酸结晶50mg溶于偏磷酸-醋酸溶液定容到250ml。装入棕色瓶中，储于冰箱内。

偏磷酸-醋酸溶液：称取偏磷酸15g，溶于40ml冰醋酸和450ml蒸馏水所配的混合液中。过滤。储于冰箱内，此液保存不得超过10天。

三、操作方法

1、制备含*的样品提取液：称取30g绿豆芽置于研钵中研磨，放置片刻（约10分钟），用2层纱布过滤，将滤液（如混浊可离心）滤入50ml容量瓶中。反复抽提2-3次，将滤液并入同一容量瓶中。zui后，用酸化的蒸馏水（每10ml蒸馏水加10%盐酸1滴）定容，混匀，备用。

2、*含量的测定：量取样品提取液10ml于锥形瓶中。用微量滴定管，以2，6-二氯酚靛酚溶液滴定样品提取液，呈微弱的玫瑰色，持续5秒钟不褪为终点，记录所用2，6-二氯酚靛酚的ml数。整个滴定过程不要超过2分钟。另取10ml用10%盐酸酸化的蒸馏水做空白对照滴定。样品提取液和空白各做三份。

3、计算结果

*mg/100g样品=（（VA-VB）×S）/W×100

VA为滴定样品提取液所用的2，6-二氯酚靛酚的平均ml数

VB为滴定空白对照所用的2，6-二氯酚靛酚的平均ml数

S为1ml2，6-二氯酚靛酚溶液相当于*的mg数

W为10ml样品提取液中含样品的g数