黄曲霉*

黄曲霉操作前打开紫外灯30-60分钟，这个大家都知道。不过你别忘了还要在操作前至少10分钟打开抽滤装置来保证效果，但紫外消毒期间建议不要进去一次特意打开抽滤装置，可以与紫外灯一起打开，黄曲霉此时不需要抽滤开的过大就可以。（所谓的抽滤装置就是就是那个风机，就是吹风超净工作台，不是过滤培养液的）!

细胞传代培养（消化法）具体操作：

一：传代前准备；

1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。

2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。

3.正确摆放使用的器械：保证足够的*作空间，不仅便于*作而且可减少污染。

4.点燃酒精灯：注意火焰不能太小。

5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。

6.取出预热好的培养用液：黄曲霉取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。

7.从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。

8.打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

二：胰蛋白酶消化；

1.加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞，*消化温度是37℃。

2. 黄曲霉 显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。

3.吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

三：吹打分散细胞；

1.吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。

2.吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中。

3.平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟。

4.弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。

四：分装稀释细胞；

1.分装：将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。

2.显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。zui后要做好标记。

五：继续培养；

用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。黄曲霉传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25％时为一个＋，占50％为＋＋，占75％时为＋＋＋。  

XY1396    黄色短杆菌

XY1397    黄曲霉

XY1398    黄绿青霉

XY1399    黄绿绿僵菌

XY1400    黄杆菌属

XY1401    环状芽孢杆菌

XY1402    化学转化小鼠鼻咽上皮细胞,TMNE细胞

XY1403    化脓性链球菌

XY1404    厚孢根霉

XY1405    猴肾细胞系 VERO E6细胞

XY1406    猴肾细胞系 MA-104细胞

XY1407    猴肾细胞系 BSC-1细胞

XY1408    猴肾细胞,Marc145细胞

XY1409    猴肾C M145细胞

XY1410    猴胚胎肾上皮细胞,marc-145-EGFP-puro细胞

XY1411    猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞,RF/6A细胞

XY1412    猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞, RF/6A细胞

XY1413    猴的骨髓间充质干细胞,MSCS细胞

XY1414    喉表皮样癌细胞,HEp-2细胞

XY1415    红曲霉

XY1416    红平红球菌

XY1417    红白细胞白血病细胞,HEL299细胞

XY1418    横纹肌瘤细胞,A-673细胞

XY1419    恒河猴肾细胞,MA-104细胞

XY1420    恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞

XY1421    恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞

XY1422    恒河猴胚肾细胞,FRhK-4细胞

XY1423    恒河猴胚肾细胞,FRhK-4细胞

XY1424    黑色素瘤细胞,B16细胞

XY1425    黑曲霉

XY1426    褐鼠胰岛素瘤上皮细胞,RIN-m细胞,

XY1427    褐球固氮菌

XY1428    和元菌种与细胞

XY1429    汉逊德巴利酵母

XY1430    海枣曲霉

XY1431    哈茨木霉

XY1432    果子狸肾上皮细胞,Hed68细胞