ELISA试剂盒操作

ELISA试剂盒操作

1. 产品有哪几种规格？可检测多少个样本？

产品分为48T和96T两种规格。

每次实验的标准曲线一般设5个不同浓度，加上空白孔，标准曲线一共需要1个孔。因此，一个48T试剂盒zui多可以测定42个样本（不做重复且一次用完），一个96T试剂盒zui多可以测定90个样本（不做重复且一次用完）。可以根据实际样本数量和实验计划选择合适的产品规格。

2.48T和96T的试剂盒有哪些不同？

48T和96T的试剂盒，每个孔的反应体系都是*一样的。不同的是试剂盒中各组分的规格，详见说明书。

3. 产品的稳定性如何？

产品在研发前期已通过严格的稳定测试，发货前亦须通过检测并提供质检报告，在市场上深受广大客户的赞许！

4.贵公司有没有酶活性检测的试剂盒？

酶活力的测定实际上就是测定酶促反应的速率。酶活力的大小即酶含量的多少，可以用每克酶制剂或每毫升酶制剂含有多少酶单位来表示，单位是U/g或U/ml。酶活力的测定方法：⑴测定完成一定量反应所需的时间，⑵测定单位时间内酶催化化学反应量。主要通过产物的增加量或底物的减少量来测定。常用的方法有：⑴分光光度法，⑵荧光法，⑶同位素测定法，⑷电化学法。

ELISA的方法一般是对可溶性抗原或抗体进行定性和定量的检测，所以酶活性是不能用ELISA来检测的。

5.一次ELISA实验需要多长时间？

双抗体夹心ELISA法一次实验需要1-2.5小时。

6.血清样本如何处理？

全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

7. 血浆样本如何处理？

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，于1000×g离心15分钟，仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

8. 尿液样本如何处理？

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

9.细胞上清液样本如何处理？

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（1000×g）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右（5000×g）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

10.   组织样本如何处理？

用预冷的PBS (0.01M,pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将*碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟，取上清检测。

11.为什么有的试剂盒是采用竞争ELISA法？

小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点，因此不能用双抗体夹心法进行测定，可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争*化抗体上的结合位点，标本中抗原量含量愈多，结合在固相上的*化抗体愈少，zuihou的显色也愈浅，即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。

12.用什么软件处理ELISA检测的数据比较好？

ELISA标准曲线拟合可以应用Curve Expert软件进行数据分析。它使用非常方便，可以生成漂亮的曲线应用到论文之中。软件可以在下载中心进行下载。

13. 试剂盒做的结果不理想怎么办？

实验结果不理想请及时与客服或技术zhichilianxi，我们可以帮您一起分析实验结果。如果仅凭实验数据无法判断，您可以将试剂盒发回给我们进行售后检测。如果是试剂盒本身的质量问题，可以为您退换货；如果是实验操作的问题，技术人员可以给您一些改进的建议。