PCR enhancer说明书

货号                                               规格

PE002-01                                     100ul

PE003-01                                     100ul

保存：-20℃

运输：2-8℃

【产品概述】

本产品由两种成分不同的10 x PCR Enhancers组成。PCR Enhancers能够促进各种耐热DNA聚合酶对许多复杂结构的DNA模板（如高GC含量）的有效扩增，增加PCR反应的灵敏度和特异性。其原理可能是通过提高DNA聚合酶的热稳定性，降低模板DNA的二级结构等机制提高目的片段的产量。由于两种PCR Enhancers的作用机制不同，使用不同的模板、引物时，其提高目的片段产量的效果存在差异，因此建议先摸索出合适的PCR Enhancer及其添加浓度后再进行PCR扩增。

【适用范围】

灵敏度要求较高的PCR、RT-PCR、Multiplex PCR、PCR条件的优化和GC含量高的DNA片段的扩增。

【产品组分】

PCR Enhancer I 100 μl

PCR Enhancer II 100 μl

【保存条件】

-20℃恒温保存，有效期一年。

【使用方法】

由于不同的引物对模板的来源、退火温度等条件存在选择性，建议使用时首先配好并分装PCR反应体系，然后向PCR反应体系中加入不同体积的PCR Enhancer I 或PCR Enhancer II（如0，0.5，1，1.5，2 μl），再按常规PCR条件进行反应，以寻找*的PCR Enhancer及其添加浓度后再进行PCR扩增。

A. 摸索*PCR Enhancer种类及其添加浓度

1．按需求配制数管50 μl PCR反应：

DNA模板 1 μl

10 x Taq PCR buffer 5 μl

10 mM dNTP mix 1 μl

正向引物 （10 μM） 1 μl

反向引物 （10 μM） 1 μl

Taq DNA polymerase （5 U/μl ） 0.5 μl

ddH2O 补足至50 μl

 模板量：10~1000 ng基因组DNA，1~30 ng质粒，或1~2 μl RT-PCR反应后的cDNA。

2.依次加入不同体积的PCR Enhancer 1 或2，如0.5 μl、1 μl、1.5 μl、2 μl等。

3.PCR反应条件的设置：

94℃ 2 min

94℃ 30 sec

55~65℃ 30 sec 25~35循环

72℃ 1 min/1 kb

72℃ 5 min

B．以摸索出来的*PCR Enhancer浓度条件进行新的一轮PCR扩增。

注意：以上举例为常规PCR反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、目的片段的大小，碱基序列和引物长短等具体情况，设定*反应条件，并根据比例放大或缩小反应体系。

【补充说明】

1．绝大多数PCR Enhancers都会降低DNA聚合酶的保真性能和特异性，因此在产量可接受的前提下，尽量选择添加zui少量的PCR Enhancer，必要时可采用提高特异性的措施如hots

2．任何一种PCR Enhancer都不可能解决所有PCR扩增遇到的困难，这是由于PCR受多种因素影响造成的。在PCR扩增遇到困难时，应先通过设立对照实验，确定问题所在，然后判断不同的PCR E

【备注】 本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。在所有情况下，本公司对此产品所承担的责任，*于此产品的价值本身。