猪圆环病毒Ⅱ型IgG抗体诊断ELISA试剂盒产品介绍:
本试剂盒系由预包被猪圆环病毒Ⅱ型(PCVⅡ)抗原的微孔板和酶标记二抗及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清或血浆中猪圆环病毒Ⅱ型特异性抗体。实验时,在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清,经温育后,若样品中含有猪圆环病毒Ⅱ型的特异性抗体,则将与包被板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有特异性抗体。
猪圆环病毒Ⅱ型IgG抗体诊断ELISA试剂盒【储存及有效期】
于2~8℃避光保存,有效期为12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,使用期限为1个月。
【试剂盒组成】
1. 猪圆环病毒Ⅱ型抗原预包被微孔板条 96T×2
2. 酶标记物 (红盖) 11ml×2
3. 样品稀释液 (黄盖) 50ml×1
4. 20X浓缩洗涤液 (透明盖) 40ml×1
5. 底物液A (白盖) 11ml×1
6. 底物液B (黑盖) 11ml×1
7. 终止液 (黄盖) 11ml×1
8. 阳性对照血清 (红盖,已灭活) 1 ml×1
9. 阴性对照血清 (绿盖,已灭活) 1 ml×1
10. 盖板膜 1张
11. 自封袋 1个
12. 说明书 1份
【样品制备】 取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品短期可于2~8℃保存,*需置-20℃保存。
【样品稀释】 用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。【洗涤液配制】浓缩洗涤液使用前应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【试验操作方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照血清100μl;样品孔每孔加入稀释后的血清样本100μl;空白对照孔不加。
4.混匀,置37℃反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A450)。
【结果判定】
1.阴性对照:正常情况下,阴性对照孔A值≤0.1;
2.阳性对照:正常情况下,阳性对照孔A值≥0.5;
3.结果判定:样品A450值大于0.38,判为阳性;样品A450值在0.2到0.38之间,判为可疑;样品A450值小于0.2,判为阴性。
【试验方法的局限性】
该试验仅作为定性检测猪圆环病毒Ⅱ型IgG抗体。
【】
企业名称:上海邦奕商贸有限公司
地 址:上海市金山区石化东泉249号
电 话:
传 真:
邮 箱:shbysw
网 址:www.bangyi-sh.com
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