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鸡禽流感抗体检测试剂盒

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更新时间:2016-09-25 04:13:32浏览次数:448次

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鸡禽流感抗体检测试剂盒

鸡禽流感抗体检测试剂盒产品介绍:

     禽流感是由禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的一种禽类急性高度致病性传染病。本病以急性败血性死亡到无症状带毒等多种病症为特点,禽类感染后体内会产生特异性抗体。本试剂盒用于检测鸡血清或血浆中禽流感病毒特异性抗体,作为评估鸡禽流感疫苗免疫状况和该病的辅助检测指标。
 
鸡禽流感抗体检测试剂盒【原    理】

   本试剂盒系由预包被禽流感病毒(AIV)重组抗原的微孔板和酶标记二抗及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测鸡血清或血浆中禽流感病毒特异性抗体。实验时,在包被板中加入对照血清和稀释的待检血清,经温育后,若样品中含有禽流感病毒的特异性抗体,则将与包被板上抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标二抗,与包被板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶结合物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有特异性抗体。
 
【储存及有效期】

   于2~8℃避光保存,有效期为12个月。
   包被板开封后请于2~8℃避光保存,使用期限为1个月。
 
试剂盒组成】 

1. 禽流感病毒抗原预包被微孔板条 96T
 2. 酶标记物  (红盖) 6ml
 3. 样品稀释液  (黄盖) 50ml×1
 4. 20X浓缩洗涤液  (透明盖) 40ml×1
 5. 底物液A  (白盖) 6ml×1
 6. 底物液B  (黑盖)  6ml×1
 7. 终止液  (黄盖)  6ml×1
 8. 阳性对照血清  (红盖,已灭活) 1 ml×1
 9. 阴性对照血清  (绿盖,已灭活) 1 ml×1
 10. 盖板膜 1张
 11. 自封袋 1个
 12. 说明书 1份
 
【样品制备】  取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品短期可于2~8℃保存,*需置-20℃保存。

 【样品稀释】  用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如5μl血清加入495μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。【洗涤液配制】浓缩洗涤液使用前应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。【试验操作方法】

 1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
 2.取所需用量包被微孔板条,设空白、阴性及阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
 3.阴性、阳性对照孔分别加入阴性、阳性对照血清100μl;样品孔每孔加入稀释后的血清样本100μl;空白对照孔不加。
 4.混匀,置37℃反应30分钟。
 5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
 6.每孔加酶标记物50μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
 7.洗涤,同步骤5。
 8.每孔依次加显色剂A、显色剂B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
 9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A450)。
 
【结果判定】

 1.阴性对照:正常情况下,阴性对照孔A值≤0.10;
 2.阳性对照:正常情况下,阳性对照孔A值≥0.3;
 3.结果判定:样品A450值大于0.18,判为阳性;样品A450值小于0.18,判为阴性。
 
【试验方法的局限性】

 该试验仅作为定性检测鸡血清或血浆中禽流感病毒IgG抗体,根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。

【】

企业名称:上海邦奕商贸有限公司

地    址:上海市金山区石化东泉249号

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