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小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶elisa检测试剂盒​检测程序

2022-5-24  阅读(92)

小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶elisa检测试剂盒检测程序:


1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。


2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。


3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。


4. 洗板:同前。


5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。


6. 洗板:同前。


7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗处反应15分钟。


8. 每孔加入100ul终止液混匀。


9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。


结果计算与判断


1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。


2. 以标准品500、250、125、62.5、31.2、15.6、7.8、0 ng/ml为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上作图,画出标准曲线。


3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应AMA含量,再乘上稀释倍数即可。


试剂盒性能


  1.   灵敏度:最小的AMA 检测浓度小于4ng/ml。


2. 特异性:可同时检测重组或天然的小鼠AMA。不与小鼠其它细胞因子有交叉反应。


3. 重复性:板内、板见变异系数均小于11%。




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