上海莼试生物技术有限公司
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更新时间:2017-06-01 09:10:34浏览次数:253
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公司是*的ATCC细胞供应商,提供 非洲绿猴肾细胞;VERO E6的报价,咨询,称技术服务,咨询选购。
细胞名称 非洲绿猴肾细胞;VERO E6
形态特性 上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞为VERO 76的克隆,对胡宁病毒,马丘波、拉沙等病毒敏感。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:4,每周换液2-3次
传代情况 P25
冻存条件 90%FBS+10%DMSO
支原体检测
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。
2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。
3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
FGFR1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGFR1 基因全长ORF克隆
FGF12 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF12 基因全长ORF克隆
FGF13 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF13 基因全长ORF克隆
FGF16 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF16 基因全长ORF克隆
FGF7 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF7 基因全长ORF克隆
BMP10 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMP10 基因全长ORF克隆
GDF15 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 GDF15 基因全长ORF克隆
GDF6 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 GDF6 基因全长ORF克隆
ACVR1C cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1C 基因全长ORF克隆
ACVR1B cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1B 基因全长ORF克隆
BMPR2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMPR2 基因全长ORF克隆
BMPR1A cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMPR1A 基因全长ORF克隆
TGFBR2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 TGFBR2 基因全长ORF克隆
FGF1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 FGF1 基因全长ORF克隆
HFE2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 HFE2 基因全长ORF克隆
ACVRL1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVRL1 基因全长ORF克隆
ACVR2A cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2A 基因全长ORF克隆
ACVR1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1 基因全长ORF克隆
BMP3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMP3 基因全长ORF克隆
GDF3 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 GDF3 基因全长ORF克隆
GDF2 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 GDF2 基因全长ORF克隆
BMP5 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 BMP5 基因全长ORF克隆
MS4A1 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 MS4A1 基因全长ORF克隆
CD19 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD19 基因全长ORF克隆
CD38 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD38 基因全长ORF克隆
CD27 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD27 基因全长ORF克隆
CD3G cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD3G 基因全长ORF克隆
IL20 cDNA Rat 大鼠 IL20 基因全长ORF克隆
CD109 cDNA Rat 大鼠 CD109 基因全长ORF克隆
CNTN2 cDNA Rat 大鼠 CNTN2 基因全长ORF克隆
JAG1 cDNA Rat 大鼠 JAG1 基因全长ORF克隆
TLR1 cDNA Rat 大鼠 TLR1 基因全长ORF克隆
BST2 cDNA Rat 大鼠 BST2 基因全长ORF克隆
IGSF8 cDNA Rat 大鼠 IGSF8 基因全长ORF克隆
LAIR1 cDNA Rat 大鼠 LAIR1 基因全长ORF克隆
CD302 cDNA Rat 大鼠 CD302 基因全长ORF克隆
CD300LG cDNA Rat 大鼠 CD300LG 基因全长ORF克隆
CD300E cDNA Rat 大鼠 CD300E 基因全长ORF克隆
CD300A cDNA Rat 大鼠 CD300A 基因全长ORF克隆
CNTN5 cDNA Rat 大鼠 CNTN5 基因全长ORF克隆
SLC44A1 cDNA Rat 大鼠 SLC44A1 基因全长ORF克隆
F3 cDNA Rat 大鼠 F3 基因全长ORF克隆
ACE cDNA Rat 大鼠 ACE 基因全长ORF克隆
NTRK1 cDNA Rat 大鼠 NTRK1 基因全长ORF克隆
MFI2 cDNA Rat 大鼠 MFI2 基因全长ORF克隆