上海莼试生物技术有限公司

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水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4
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更新时间:2017-06-01 09:25:50浏览次数:339

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【简单介绍】
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4售后:收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时销售人员,我们将尽快为您解决。

公司是*的ATCC细胞供应商,提供水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4的报价,咨询,称技术服务,咨询选购
细胞名称     水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S4        
形态特性      成纤维细胞样        
生长特性     贴壁生长        
特征特性      该细胞系来源于一雄性河川型水牛的耳部皮肤组织,2010年由中科院昆明细胞库建立。         
培养条件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS        
传代方法      1:2传代;3-4天一次        
传代情况     P2        
冻存条件      基础培养基+5%DMSO+20%FBS         
支原体检测     荧光法(-)         
STR      -        
同工酶             
染色体             
使用权限     A类    
培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。

2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。

3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。

4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。

ABCD4     cDNA    Rat    大鼠 ABCD4 基因全长ORF克隆
RBM47     cDNA    Rat    大鼠 RBM47 基因全长ORF克隆
NCAPH2     cDNA    Rat    大鼠 NCAPH2 基因全长ORF克隆
SPCS2     cDNA    Rat    大鼠 SPCS2 基因全长ORF克隆
SLC25A13     cDNA    Rat    大鼠 SLC25A13 基因全长ORF克隆
HBA2     cDNA    Rat    大鼠 HBA2 基因全长ORF克隆
CDIP1     cDNA    Rat    大鼠 CDIP1 基因全长ORF克隆
UMPS     cDNA    Rat    大鼠 UMPS 基因全长ORF克隆
CCNB1     cDNA    Rat    大鼠 CCNB1 基因全长ORF克隆
FAM45A     cDNA    Rat    大鼠 FAM45A 基因全长ORF克隆
RGD1306063     cDNA    Rat    大鼠 RGD1306063 基因全长ORF克隆
MYOT     cDNA    Rat    大鼠 MYOT 基因全长ORF克隆
PTBP1     cDNA    Rat    大鼠 PTBP1 基因全长ORF克隆
YWHAZ     cDNA    Rat    大鼠 YWHAZ 基因全长ORF克隆
CPXM1     cDNA    Rat    大鼠 CPXM1 基因全长ORF克隆
NCSTN     cDNA    Rat    大鼠 NCSTN 基因全长ORF克隆
SC5D     cDNA    Rat    大鼠 SC5D 基因全长ORF克隆
NUCB1     cDNA    Rat    大鼠 NUCB1 基因全长ORF克隆
CAPN6     cDNA    Rat    大鼠 CAPN6 基因全长ORF克隆
DDX18     cDNA    Rat    大鼠 DDX18 基因全长ORF克隆
HSP90AB1     cDNA    Rat    大鼠 HSP90AB1 基因全长ORF克隆
SLC35A4     cDNA    Rat    大鼠 SLC35A4 基因全长ORF克隆
NARFL     cDNA    Rat    大鼠 NARFL 基因全长ORF克隆
PITPNB     cDNA    Rat    大鼠 PITPNB 基因全长ORF克隆
ETFDH     cDNA    Rat    大鼠 ETFDH 基因全长ORF克隆
ANGPTL2     cDNA    Rat    大鼠 ANGPTL2 基因全长ORF克隆
RBM41     cDNA    Rat    大鼠 RBM41 基因全长ORF克隆
SRP72     cDNA    Rat    大鼠 SRP72 基因全长ORF克隆
MORF4L1     cDNA    Rat    大鼠 MORF4L1 基因全长ORF克隆
PPME1     cDNA    Rat    大鼠 PPME1 基因全长ORF克隆
ZWINT     cDNA    Rat    大鼠 ZWINT 基因全长ORF克隆
SERPINA11     cDNA    Rat    大鼠 SERPINA11 基因全长ORF克隆
GDPD2     cDNA    Rat    大鼠 GDPD2 基因全长ORF克隆
HPX     cDNA    Rat    大鼠 HPX 基因全长ORF克隆
YIF1A     cDNA    Rat    大鼠 YIF1A 基因全长ORF克隆
HSD17B2     cDNA    Rat    大鼠 HSD17B2 基因全长ORF克隆
LMAN2     cDNA    Rat    大鼠 LMAN2 基因全长ORF克隆
EIF3G     cDNA    Rat    大鼠 EIF3G 基因全长ORF克隆
TCEAL7     cDNA    Rat    大鼠 TCEAL7 基因全长ORF克隆
CHMP1B     cDNA    Rat    大鼠 CHMP1B 基因全长ORF克隆
ARHGAP1     cDNA    Rat    大鼠 ARHGAP1 基因全长ORF克隆
CFH     cDNA    Rat    大鼠 CFH 基因全长ORF克隆
SSR3     cDNA    Rat    大鼠 SSR3 基因全长ORF克隆
PPP2R1A     cDNA    Rat    大鼠 PPP2R1A 基因全长ORF克隆
HSPD1     cDNA    Rat    大鼠 HSPD1 基因全长ORF克隆

 



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