公司是*的ATCC细胞供应商，提供大额牛肾细胞；BFR-K1的报价，咨询，称技术服务，咨询选购。
细胞名称     大额牛肾细胞；BFR-K1        
形态特性      上皮样        
生长特性     贴壁生长        
特征特性      该细胞系来源于一雄性新生大额牛的肾组织。2000年由昆明细胞库建立。         
培养条件      M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  15%NBS        
传代方法      1：2传代；3-4天一次        
传代情况     P2        
冻存条件      基础培养基+5%DMSO+20%FBS         
支原体检测     荧光法（-）         
STR      -        
同工酶             
染色体             
使用权限     B类    
培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境：首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。

2、营养物质：细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。

3、温度和pH：细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。

4、气体环境：培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。

CD86     cDNA    Mouse    小鼠 B7-2 / CD86 基因全长ORF克隆
TNFSF9     cDNA    Mouse    小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 基因全长ORF克隆
SERPINB10     cDNA    Mouse    小鼠 Serpinb10 基因全长ORF克隆
CTLA4     cDNA    Mouse    小鼠 CTLA4 基因全长ORF克隆
CADM3     cDNA    Mouse    小鼠 CADM3 基因全长ORF克隆
KNG1     cDNA    Mouse    小鼠 KNG1 转录变体3 基因全长ORF克隆
JAM3     cDNA    Mouse    小鼠 JAM3 基因全长ORF克隆
JAM2     cDNA    Mouse    小鼠 JAM2 基因全长ORF克隆
PRLR     cDNA    Mouse    小鼠 PRLR 基因全长ORF克隆
POSTN     cDNA    Mouse    小鼠 POSTN 基因全长ORF克隆
MDGA2     cDNA    Mouse    小鼠 MDGA2 基因全长ORF克隆
LIFR     cDNA    Mouse    小鼠 LIFR 基因全长ORF克隆
BCHE     cDNA    Mouse    小鼠 BCHE 基因全长ORF克隆
CRP     cDNA    Mouse    小鼠 CRP 基因全长ORF克隆
PECAM1     cDNA    Mouse    小鼠 CD31 / PECAM1 基因全长ORF克隆
ENG     cDNA    Mouse    小鼠 ENG 转录变体3 基因全长ORF克隆
CD7     cDNA    Mouse    小鼠 CD7 基因全长ORF克隆
GLO1     cDNA    Mouse    小鼠 GLO1 基因全长ORF克隆
PPIA     cDNA    Mouse    小鼠 PPIA 基因全长ORF克隆
HPX     cDNA    Mouse    小鼠 HPX 基因全长ORF克隆
PILRA     cDNA    Mouse    小鼠 PILRA 基因全长ORF克隆
SERPINB8     cDNA    Mouse    小鼠 Serpinb8 基因全长ORF克隆
IFNAR1     cDNA    Mouse    小鼠 IFNAR1 基因全长ORF克隆
THY1     cDNA    Mouse    小鼠 THY1 基因全长ORF克隆
OMD     cDNA    Mouse    小鼠 OMD 基因全长ORF克隆
TNFRSF10B     cDNA    Mouse    小鼠 TNFRSF10B / TRAILR2 基因全长ORF克隆
THSD1     cDNA    Mouse    小鼠 THSD1 基因全长ORF克隆
TIMP1     cDNA    Mouse    小鼠 TIMP1 基因全长ORF克隆
ELANE     cDNA    Mouse    小鼠 ELANE / ELA2 基因全长ORF克隆
ACVR2A     cDNA    Mouse    小鼠 ACVR2A 基因全长ORF克隆
EFNB2     cDNA    Mouse    小鼠 EFNB2 基因全长ORF克隆
CD36     cDNA    Mouse    小鼠 CD36 基因全长ORF克隆
CTSA     cDNA    Mouse    小鼠 CTSA 基因全长ORF克隆
MIF     cDNA    Mouse    小鼠 MIF 基因全长ORF克隆
LYVE1     cDNA    Mouse    小鼠 LYVE-1 基因全长ORF克隆
OGN     cDNA    Mouse    小鼠 OGN 基因全长ORF克隆
MBL2     cDNA    Mouse    小鼠 MBL 基因全长ORF克隆
LY86     cDNA    Mouse    小鼠 LY86 / MD-1 基因全长ORF克隆
IL13RA2     cDNA    Mouse    小鼠 IL13Ra2 基因全长ORF克隆
LCN2     cDNA    Mouse    小鼠 LCN2 / NGAL 基因全长ORF克隆
CSF1R     cDNA    Mouse    小鼠 MCSFR / CSF1R 基因全长ORF克隆
ITGA11     cDNA    Mouse    小鼠 Integrinalpha11 基因全长ORF克隆
MEP1A     cDNA    Mouse    小鼠 MEP1A 基因全长ORF克隆
SFRP5     cDNA    Mouse    小鼠 sFRP-5 基因全长ORF克隆
IL34     cDNA    Mouse    小鼠 IL34 转录变体1 基因全长ORF克隆
ITGB1     cDNA    Mouse    小鼠 Integrinbeta1 基因全长ORF克隆
SFRP4     cDNA    Mouse    小鼠 sFRP-4 基因全长ORF克隆
SCARB2     cDNA    Mouse    小鼠 SCARB2 基因全长ORF克隆