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人胚肺成纤维细胞;Walvax-2
人胚肺成纤维细胞;Walvax-2
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更新时间:2017-06-06 10:12:08浏览次数:290

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【简单介绍】
人胚肺成纤维细胞;Walvax-2收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

公司是*的ATCC细胞供应商,提供人胚肺成纤维细胞;Walvax-2的报价,咨询,称技术服务,咨询选购
细胞名称  人胚肺成纤维细胞;Walvax-2  
形态特性   成纤维细胞样  
生长特性  贴壁生长  
特征特性   该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。   
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS  
传代方法   1:3传代,3-4天传1次  
传代情况  C5  
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS   
支原体检测  阴性   
STR    
同工酶    
染色体    
使用权限  未定培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。

2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。

3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。

4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。

机理以及发展新的治疗方法。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常腹腔主动脉组织。  
2)细胞鉴定:血小板-内皮细胞粘附分子(PECAM-1/CD31)或血管假性血友病子(WF)免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。  
腹腔主动脉平滑肌细胞  
细胞详述  
腹腔主动脉是人体的大动脉,直接延续于发自左心室的主动脉,胸腔主动脉,沿脊柱左侧下行,主要负责腹腔脏器和腹壁的血液供应。动脉疾病发生的一个主要素是由于血管平滑肌细胞转变成为了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌细胞能表达钙离子通道,ICAM-1和CAM-1。其中ICAM-1和CAM-1的表达可能是造成血管壁炎症反应,并进一步造成血管疾病的原 。此,对动脉血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和确定新的血管疾病的靶向治疗方法。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常腹腔主动脉组织。  
2)细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。  
腹腔主动脉外膜成纤维细胞  
细胞详述  
腹腔主动脉是人体的大动脉,直接延续于发自左心室的主动脉,胸腔主动脉,沿脊柱左侧下行,主要负责腹腔脏器和腹壁的血液供应。主动脉是由内膜、中层弹力层和外膜构成,三层紧密贴合在一起。其中,外膜是专门的支持组织,外膜成纤维是外膜的主要成分,在血管炎症反应、血管重塑等方面发挥重要作用。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常主动脉组织。  
2)细胞鉴定:波形蛋白(imentin)免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。  
股动脉内皮细胞  
细胞详述  
股动脉是下肢动脉的主干,由髂外动脉延续而来。在腹股沟韧带中点的深面入股三角。在股三角内,股动脉先位于股静脉的外侧,逐渐从外侧跨到股静脉的前方,下行入收肌管,再穿收肌腱裂孔至腘窝,易名腘动脉。股动脉在腹股沟中点处位置表浅,可摸到搏动,是临床上急救压迫止血和进行穿刺的部位。股动脉动脉内皮细胞组成了动脉内壁,并持续受到血流剪切应力的影响。内皮细胞在切应力的作用下,分泌不同的内皮子并进而影响血管收缩和生长。主动脉内皮细胞也调节细胞黏附分子的表达来控制和精确调节炎症反应和组织纤维化。体外培养的原代股动脉内皮细胞可有效地帮助研究者研究内皮功能失调的机理,动脉粥样化等疾病的发病机理以及发展新的治疗方法。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常股动脉组织。  
2)细胞鉴定:血管假性血友病子(WF)免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。  
股动脉平滑肌细胞  
细胞详述  
股动脉是下肢动脉的主干,由髂外动脉延续而来。在腹股沟韧带中点的深面入股三角。在股三角内,股动脉先位于股静脉的外侧,逐渐从外侧跨到股静脉的前方,下行入收肌管,再穿收肌腱裂孔至腘窝,易名腘动脉。股动脉在腹股沟中点处位置表浅,可摸到搏动,是临床上急救压迫止血和进行穿刺的部位。动脉疾病发生的一个主要素是由于血管平滑肌细胞转变成为了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌细胞能表达钙离子通道,ICAM-1和CAM-1。其中ICAM-1和CAM-1的表达可能是造成血管壁炎症反应,并进一步造成血管疾病的原 。此,对动脉血管平滑肌细胞的体外培养和研究可用来发现和确定新的血管疾病的靶向治疗方法。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常股动脉组织。  
2)细胞鉴定:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。  
肺微血管内皮细胞  
细胞详述  
肺微血管内皮细胞构成半选择性屏障,该屏障对于肺气体交换,调节液体和可溶物在血液与肺间质之间的流动具有重要意义。它还具有代谢功能,可以执行一定的非呼吸功能。在肺损伤中,肺微血管内皮细胞是活性氧类的重要靶细胞之一。在肺炎的发生过程中,神体液介质和氧化剂作用于内皮细胞,使得细胞间隙渗透性增加,蛋白质由血液进入间质。细胞间隙渗透性的增加导致低氧血症,出现成人呼吸窘迫综合征和非心源性肺水肿。  
细胞特性  
1)细胞来源于实验动物的正常肺组织。  
2)细胞鉴定:血管假性血友病子(WF)免疫荧光染色为阳性  
。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。

 



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