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细胞名称  人正常眼睑上皮细胞；HNEEC/HL-015  
形态特性   上皮样  
生长特性  贴壁生长  
特征特性   该细胞属保藏，其特征特性尚未公开。   
培养条件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS　  
传代方法   1:3传代，3-4天传1次  
传代情况  C5  
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS　  
支原体检测  阴性　  
STR    
同工酶    
染色体    
使用权限  未定培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境：首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。

2、营养物质：细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。

3、温度和pH：细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。

4、气体环境：培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
肝内胆管上皮细胞的主要功能是分泌大量胆汁。同时，肝内胆管上皮细胞通过控制激素调控的分泌和吸收，在保持、调整和扩大胆小管道结构中发挥重要作用。肝内胆管上皮细胞的病变主要引起胆管炎、胆管结石甚至胆管癌。  
细胞特性  
1）来源：1-3天SD大鼠肝脏组织  
肝内胆管上皮细胞  
细胞详述  
胆管，输送胆汁的管道。由肝分泌的胆汁，肝左、右管、肝总管、胆囊管进入胆囊贮存，肝内胆管的部分包括：左、右肝管；左内叶、左外叶、右前叶、右后叶胆管；各肝段胆管；小叶间胆管；毛细胆管。  
常见的胆管病变如胆道闭塞、原发性硬化性胆管炎、胆管癌等，都是以胆管上皮为病变靶位，此研究胆管上皮细胞的生物学特性和病理变化有重要意义。在这些病变过程中，肝内胆管上皮常暴露于常暴露于较高炎症子中，会表现细胞损伤和继发性增值为特征的病理变化。  
细胞特性  
1)细胞来源于实验动物正常肝脏组织。  
2)细胞鉴定：细胞角蛋白19（CK-19）免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式：上皮样，多角形细胞，贴壁培养。  
肝外胆管上皮细胞  
细胞详述  
肝外胆管由左右肝管、肝总管、胆总管组成。肝内胆管多级汇合形成左、右肝管，左、右肝管出肝后，在肝门部汇合形成肝总管。 肝总管与胆囊管汇合形成胆总管。肝外胆管上皮细胞通过控制激素调控的分泌 和吸收，在保持、调整和扩大胆小管道结构中发挥重要作用。肝外胆管上皮细胞的病变主要引起胆管炎、胆管结石。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常胆管组织。  
2)细胞鉴定：广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。  
肝实质细胞  
细胞详述  
随着人们生活水平的提高，饮食习惯的改变，肿瘤发病率也在不断的增加，如肝癌、胃癌和大肠癌等明显增加的趋势。肝脏作为人体重要的器官，在整个物质代谢过程中具有广泛而多样的功能。肝脏也是体内药物代谢的重要器官，体内复杂的环境对药物代谢等的影响是不言而喻的。但是在体研究药物或其它化学物质在肝细胞代谢的分子机制有一定的困难，此我们建立体外的原代肝细胞培养模型用于肝细胞分子生物学特征的研究，作为对在体肝脏研究模型的有益补充。采用改良的灌流方法将肝脏中的肝实质细胞分离、纯化、体外培养，全面分析原代肝细胞的生长和功能状态，为肝细胞分子生物学特征的研究以及新药对肝脏的作用机制的研究提供更有价值的线索，以更好的解释药物作用的机制。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常肝组织。  
2)细胞鉴定：葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase)化学染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式：上皮样，多角形细胞，贴壁培养。  
肝星状细胞  
细胞介绍  
肝星状细胞（HSC)位于Disse间隙内，紧贴着肝窦内皮细胞和肝细胞。其形态不规则，胞体呈圆形或不规则形，常伸出数个星状胞突包绕着肝血窦。此外，HSC还伸出胞突与肝细胞、邻近的星状细胞相接触。HSC是ECM的主要来源， HSC激活并转化为肌成纤维细胞样细胞(MFC)，各种致纤维化素均把HSC作为zui终靶细胞。肝星状细胞激活并转化为肌成纤维细胞样细胞(MFC)，各种致纤维化素均把HSC作为zui终靶细胞，正常情况下肝星状细胞处于静止状态。当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时，肝星状细胞被激活，其表型由静止型转变为激活型。激活的肝星状细胞一方面通过增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成和肝内结构的重建，另一方面通过细胞收缩使肝窦内压升高。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常肝组织。  
2)细胞鉴定：结蛋白（Desmin)免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
肝窦内皮细胞  
细胞详述  
肝窦内皮细胞是肝脏非实质细胞中数目zui多的细胞，约占肝非实质细胞总数的70%，在表型、功能上与普通毛细血管内皮细胞有较大差异。肝窦内皮细胞之间缺乏细胞间连接，细胞下基底膜物质很少，此窦内皮通透性较高，有利于调节物质交换。  
不同于肝细胞的自我复制，肝再生时新生LSECs主要来自肝内外其他细胞成分的分化替代，不少研究证实了肝再生时LSECs的骨髓源性替代。内皮祖细胞是参与这一过程的主要细胞成分。  
窗孔是肝窦内皮细胞特征性的结构，从＜10nm至1～2μm不等，生理条件下由于窗孔结构的存在和缺乏内皮下完整基膜的结构，由肝窦内皮细胞构成的肝窦壁是全身毛细血管壁中*缺乏基膜的毛细血管，除窦内的血细胞外，血浆成分均能从窗孔进入Disse间隙，进行物质交换。  
细胞特性