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上海莼试生物技术有限公司
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更新时间:2017-06-06 10:21:31浏览次数:257
联系我们时请说明是环保在线上看到的信息,谢谢!
细胞名称 人胚肾二倍体细胞;HEK-2
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来自一女性胎儿的正常肾组织。昆明细胞库于1986年建立。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
传代方法 1:2传代;3-4天一次
传代情况 P4
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类人胚肾二倍体细胞;HEK-2
实验方法和步骤
(一) 前处理 用台称称量青蛙或蟾蜍的体重,然后按10微克/克动物体重的剂量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小时后,将动物处死,用剪刀剪开皮肤和肌肉,取出大腿骨和胫骨,剔净股骨上的肌肉,然后用一小块纱布来回搓干净。剪开两端股骨,用注射器(内装5ml 1% 柠檬酸钠溶液)缓慢冲洗骨髓细胞到离心管中,经平衡后离心8分钟,速度为1000转/分钟。
(三) 低渗 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管冲匀沉淀物,在恒温水浴(28℃)处理20分钟或更长一点时间。
(四) 固定 低渗后,以每分钟1000转速度离心10分钟。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,冲散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 冲匀后静止固定20分钟。重复固定1~2次,离心的速度与时间以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,冲匀沉淀物。从冰箱取出预先冷冻的载片,每片滴3滴细胞悬液,立即用嘴向载片上吹气,使细胞均匀分散,在酒精灯火焰上来回烤一下,以助染色体更好分散和展开。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分钟(Giemsa原液用PH=6.8磷酸缓冲液稀释),然后用水冲洗,片干后镜检。 (七) 镜检 在中倍镜下找染色体分散好的中期分裂相,转至高倍镜详细观察两栖类染色体的数目,属于大、中、小染色体各有多少条。
注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
细胞详述
胰岛细胞分泌胰高血糖素,与胰岛素一起发挥作用来发挥调节血糖的水平。胰岛根据其分泌激素的功能可分为:β细胞、α细胞、δ细胞、胰岛PP细胞。体外培养胰岛细胞为胰岛移植、胰岛素分泌机制和降糖药物作用机制等研究提供了前提和基础。
细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常胰腺组织。
2)细胞鉴定:双硫腙(DTZ)化学染色染色为阳性。
3)鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:岛状成团生长,贴壁培养。
胰岛β细胞
细胞详述
胰岛细胞分泌胰高血糖素,与胰岛素一起发挥作用来发挥调节血糖的水平。胰岛根据其分泌激素的功能可分为:β细胞、α细胞、δ细胞、胰岛PP细胞。其中,能分泌胰岛素,与胰岛A细胞分泌的胰高血糖素一起起到调节血糖的作用。胰岛β细胞功能受损、胰岛素分泌或相对不足(胰岛素抵抗),会使血糖升高,从而引发糖尿病。而胰岛β细胞癌变会生成胰岛素瘤,引起恶性血糖降低症状。
细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常胰腺组织。
2)细胞鉴定:胰岛素(Insulin)免疫荧光染色为阳性。
3)鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
垂体细胞
细胞详述
垂体是机体的重要的内分泌腺体,由生长激素和促肾上腺皮质激素细胞等细胞构成,在机体的生长发育、生命活动、内分泌调节以及衰老死亡过程中起着重要意义。此,垂体细胞的体外培养为进一步研究垂体与
生殖的神内分泌调节机制及垂体移植研究等方面提供了基础和前提。
细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常垂体组织。
2)细胞鉴定:LH、FSH与PRL免疫荧光染色为阳性。
3)鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:梭形或多角形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
胸腺细胞
细胞详述
胸腺作为哺乳动物的中枢免疫器官,不仅是T淋巴细胞分化、发育、成熟,同时向外周T细胞库输出T淋巴细胞的场所。胸腺细胞密集于皮质内,其表达自身抗原