公司是*的ATCC细胞供应商，提供人皮肤成纤维细胞；HSAS4
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细胞名称  人皮肤成纤维细胞；HSAS4  
形态特性   成纤维细胞样　  
生长特性  贴壁生长  
特征特性   该细胞系来源于一男性的皮肤组织。2005年由昆明细胞库建立。   
培养条件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS  
传代方法   1：2传代；3-4天一次  
传代情况  P2  
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS　  
支原体检测  荧光法（-）　  
STR   Amelogenin：XY；D8S1179：11,13；D21S11：29,31；D7S820：10,11；CSF1PO：10,13；D3S1358：16；TH01： 9；D13S317：8，11；D16S539： 12；D2S1338：20,21；D19S433：13；vWA：14,18；THOX：8, 11；D18S51：15,17；D5S818：11, 12；FGA：21,24。  
同工酶    
染色体    

使用权限  A类培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境：首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。

2、营养物质：细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。

3、温度和pH：细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。

4、气体环境：培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

操作步骤：
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中，将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片，待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室温孵育爬片20min，使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶，室温孵育15min（一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢），PBS冲洗3次，每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min，PBS冲洗3次，每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育：按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗，滴加在爬片上，于4°C湿盒中孵育一夜，PBS冲洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：选与一抗对应的二抗，按比例稀释后滴加在爬片上，37°C湿盒中孵育30min，PBS冲洗3次，每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干，爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下观察，当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染：用Harris苏木素复染30s~1min，水洗后用1%的盐酸酒精分化，再用蒸馏水（或PBS）水洗返蓝。
10. 封片：将中性树胶滴在爬片一侧，再用盖玻片盖上，先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧，以免产生气泡，封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
重塑基质的表型，同时，它们会分泌大量的透明质酸来应对修复时的炎症反应。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常皮肤组织。  
2)细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（imentin）免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。  
角质形成细胞  
细胞详述  
角质形成细胞是一种不断分化的复层鳞状上皮细胞，其分化的zui终阶是形成角蛋白。根据角质形成细胞的发展阶段和特点，从内向外可将其分为五层。基底细胞层又称生发层，棘细胞层，颗粒层，透明层，角质层。  
角质形成细胞的分化成熟表现为从基底层到向角质层的逐渐移行。在单一移行过程中，角质形成;细胞的形状和功能也逐渐发生着变化，从单层柱状上皮的基底层到扁平的细胞核消失的角质层。新生的基底细胞进入棘细胞层，然后上移到颗粒层的zui上层。  
化过程的有效的模型。  
细胞特性  
1)细胞来源于实验动物正常肌肉组织。  
2)细胞鉴定：肌动蛋白（α-actin）免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式：长梭状细胞，贴壁培养。  
骨骼肌成纤维细胞  
细胞详述  
肌肉可分为肌腹和肌腱，其中两端较细呈乳白色的部分为肌腱，呈索条或扁带状，由平行的胶原纤维束构成，色白，有光泽，但无收缩能力，腱附着于骨处与骨膜牢固地编织在一起，属于结缔组织，同时，肌腹的表面包以结缔组织性外膜，向两端则与肌腱组织融合在一起，这些结缔组织是由成纤维细胞构成，具有支持、连接、保护和营养功能。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常腿部肌肉组织。  
2)细胞鉴定：波形蛋白（imentin）免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。  
纤维环细胞  
细胞详述  
纤维环，位于椎间盘的周缘部，由纤维软骨组成，纤维环的纤维在椎体间斜行，在横切面上排列成同心环状，相邻环的纤维具有相反的斜度，而相互交叉。纤维环细胞位于胶原纤维束之前，合成和分泌纤维环细胞外基质，维持正常的纤维环结构和功能。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常椎间盘组织。  
2)细胞鉴定：Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)或Ⅰ型胶原(Collagen Ⅰ)免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式：多角形细胞，不规则细胞，贴壁培养。  
髓核细胞  
细胞详述  
髓核是乳白色半透明胶状体，富于弹性，为椎间盘结构的一部分，位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。髓核细胞的过早衰老与凋亡是导致椎间盘退行性变过程的主要原之一，主要表现为退变椎间盘内髓核细胞功能降低和数量减少，使得其Ⅱ型胶蛋白聚糖等基质分泌量下降，zui终导致椎间盘维持脊柱高度、承受各方应力等生物力学功能丧失。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常椎间盘组织。  
2)细胞鉴定：Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)免疫荧光染色为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式：梭形或多角形细胞，不规则细胞，贴壁培养。  
破骨细胞  
细胞详述  
破骨细胞(osteoclast，亦称bone-resorbing cells)是骨组织成分的一种，行使骨吸收（bone resorption）的功能。破骨细胞与成骨细胞（osteoblast，亦称bone-forming cells）在功能上相对应。二者协同，在骨骼的发育和形成过程中发挥重要作用。高表达的抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate resistant acid phosphatase)和组织蛋白酶K（cathepsin K)是破骨细胞主要标志。  
细胞特性  
1)组织来源于实验动物的正常关节组织。  
2)细胞鉴定：抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP)为阳性。  
3)鉴定细胞纯度高于90%。  
4)不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。  
5)细胞生长方式：圆形，不规则细胞，贴壁培养。  
皮肤成纤维细胞  
细胞详述  
成纤维细胞属于由中胚层分化而来的间质细胞。由于这些细胞非常容易培养，它们已被广泛用于细胞和分子生物学研究中。一般而言，成纤维细胞能够分泌I型和III型胶原等细胞外基质，并且研究表明不同器官中的成纤维细胞有显著的不同。伤口修复时，真皮成纤维细胞由可增殖，可迁移的表型变为有收缩性的，可