上海莼试生物技术有限公司
主营产品: ELISA试剂盒,ELISA试剂盒价格,ELISA试剂盒报价 |
联系电话
13585831301
公司信息
- 联系人:
- 李小姐
- 电话:
- 021-59541103
- 手机:
- 13585831301
- 售后电话:
- 13585831301
- 传真:
- 021-60443211
- 地址:
- 上海市嘉定区嘉罗公路1661号23号楼311
- 邮编:
参考价 | 面议 |
- 型号
- 品牌
- 厂商性质 经销商
- 所在地 上海市
更新时间:2017-06-08 11:28:32浏览次数:266
联系我们时请说明是环保在线上看到的信息,谢谢!
公司是*的ATCC细胞供应商,提供人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS1
的报价,咨询,称技术服务,咨询选购。
细胞名称 人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS1
形态特性 多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 野生型PS1基因转染稳定表达APP基因的HEK293细胞,表达Aβ。
培养条件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;250ug/ml G418
传代方法 1:3传代;2~3天1次。
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR
同工酶
染色体
人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS1
使用权限 A类 培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。
2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。
3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS1
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
3) 鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
真皮成纤维细胞
细胞详述:
皮肤指身体表面包在肌肉外面的组织,是人体zui大的器官,主要承担着保护身体、排汗、感觉冷热和压力等功能。皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。
成纤维细胞属于由中胚层分化而来的间质细胞。由于这些细胞非常容易培养,它们已被广泛用于细胞和分子生物学研究中。一般而言,成纤维细胞能够分泌I型和III型胶原等细胞外基质,并且研究表明不同器官中的成纤维细胞有显著的不同。伤口修复时,真皮成纤维细胞由可增殖,可迁移的表型变为有收缩性的,可重塑基质的表型,同时,它们会分泌大量的透明质酸来应对修复时的炎症反应。
细胞特性:
1) 细胞来源于手术切除的正常组织。
2) 细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(imentin)免疫荧光染色为阳性。
3) 鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:成纤维样细胞,贴壁培养。
胆囊上皮细胞
细胞详述:
胆囊,是位于右方肋骨下肝脏后方的梨形囊袋构造,有浓缩和储存胆汁之作用。胆囊壁由粘膜、肌层和外膜三层组成。
胆囊内面以粘膜覆盖,有发达的皱襞。胆囊收缩排空时,皱襞高大而分支;胆囊充盈时,皱襞减少变矮。粘膜上皮为单层柱状,内分散分部着少量杯状细胞。胆囊粘膜细胞具有典型的吸收型细胞的特征,具有较强的吸收和浓缩功能,上皮细胞吸收胆汁中的水和无机盐,细胞侧面的质膜转运至上皮细胞间隙内,吸收的水和无机盐通过基膜进入固有层的血管和淋巴管内。同时,胆囊粘膜亦有分泌功能,分泌粘液。
细胞特性:
1) 细胞来源于人正常胆囊组织。
2) 细胞鉴定:细胞角蛋白19(CK-19)免疫荧光染色为阳性。
3) 鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
肝星状细胞
细胞详述:
肝星状细胞位于Disse间隙内,紧贴着肝窦内皮细胞和肝实质细胞。其形态不规则,胞体呈圆形或不规则形,常伸出数个星状胞突包绕着肝血窦。
正常情况下肝星状细胞表现为富含脂滴的静止型,其功能主要有:代谢和贮存、储存脂肪、合成和分泌胶原及糖蛋白、蛋白多糖等基质成分、合成基质金属蛋白酶及其组织抑制剂、表达细胞子及受体、参与肝窦血流调节。
肝星状细胞是细胞外基质的主要来源,正常情况下肝星状细胞处于静止状态。当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时,肝星状细胞被激活,其表型由静止型转变为激活型,肝星状细胞激活并转化为肌成纤维细胞样细胞,各种致纤维化素均把HSC作为zui终靶细胞。激活的肝星状细胞一方面通过增生和分泌细胞外基质参与肝纤维化的形成和肝内结构的重建,另一方面通过细胞收缩使肝窦内压升高。
细胞特性:
1) 细胞来源于人正常肝脏组织。
2) 细胞鉴定:CD95L免疫荧光染色为阳性(静止状态);结蛋白(Desmin)或者平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色为阳性。
3) 鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HI-1、 HB、HC、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:长梭状,星状细胞,贴壁培养。
脉络膜成纤维细胞
细胞详述
脉络膜新生血管(choroidal neoascularization,CN)已成为眼科学领域的研究热点之一,在血管外侧有结缔组织,结缔组织是由成纤维细胞构成,起到支持和保护作用。
细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常眼组织。