上海莼试生物技术有限公司

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Sars结构蛋白表达株;293sars181A
Sars结构蛋白表达株;293sars181A
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更新时间:2017-06-08 11:38:42浏览次数:247

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【简单介绍】
Sars结构蛋白表达株;293sars181A
,采用干冰保存运输收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

细胞名称  Sars结构蛋白表达株;293sars181A  
形态特性   上皮样  
生长特性  贴壁生长   
特征特性   表达Sars结构蛋白。   
培养条件   IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS   
传代方法   1:6传代;2~3天1次  
传代情况  不详  
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS   
支原体检测  培养法(-)   
STR   Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12,14;D16S539:9;D18S51:18;D19S433:18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:15,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,14;FGA:23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19;  
同工酶    
染色体      
使用权限  A类 Sars结构蛋白表达株;293sars181A
实验方法和步骤
(一) 前处理 用台称称量青蛙或蟾蜍的体重,然后按10微克/克动物体重的剂量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小时后,将动物处死,用剪刀剪开皮肤和肌肉,取出大腿骨和胫骨,剔净股骨上的肌肉,然后用一小块纱布来回搓干净。剪开两端股骨,用注射器(内装5ml 1% 柠檬酸钠溶液)缓慢冲洗骨髓细胞到离心管中,经平衡后离心8分钟,速度为1000转/分钟。
(三) 低渗 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管冲匀沉淀物,在恒温水浴(28℃)处理20分钟或更长一点时间。
(四) 固定 低渗后,以每分钟1000转速度离心10分钟。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,冲散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 冲匀后静止固定20分钟。重复固定1~2次,离心的速度与时间以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,冲匀沉淀物。从冰箱取出预先冷冻的载片,每片滴3滴细胞悬液,立即用嘴向载片上吹气,使细胞均匀分散,在酒精灯火焰上来回烤一下,以助染色体更好分散和展开。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分钟(Giemsa原液用PH=6.8磷酸缓冲液稀释),然后用水冲洗,片干后镜检。 (七) 镜检 在中倍镜下找染色体分散好的中期分裂相,转至高倍镜详细观察两栖类染色体的数目,属于大、中、小染色体各有多少条。

注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
中文名称:EDTA抗原修复液(1X,pH8)  
英文名字:EDTA Antigen Retrieal Solution(1×,pH8)  
产品描述  
        细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阴性染色结果。所以要求在进行免疫组化染色时,需要行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高检测的准确性。  
EDTA抗原修复液(EDTA  Antigen Retrieal solution)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。  
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时,考虑进行抗原修复。  
按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算,100ml抗原修复液(1×)可以用于10个样本的抗原修复。  

产品优势  
能有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。  
储存条件  
冷藏(2-8℃)  
注意事项  
1. 抗原修复时应选择温度。(温度在92℃-98℃是合适的,尤其在95℃为)  
2. 抗原修复液必须遵循自然降温规律,否则效果不好或达不到抗原修复的目的。  
3. 抗原修复的方法,都采用加热的方法,尤其是微波辐射加热法,该法由于产热快。液体容易挥发直至干涸。此,应用于抗原修复的液体,一定要充足,防止切片干涸。  
4. 用于抗原修复的切片,必须附贴牢固,否则发生掉片,则前功尽弃。  
5. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。  
中文名称:EDTA抗原修复液(50X,pH8)  
英文名字:EDTA Antigen Retrieal Solution(50X,pH8)  
中文名称:HRP标记抗体稀释液  
英文名字:HRP标记抗体稀释液  
产品说明:  
HRP标记抗体稀释液(HRP-Antibody Dilution Buffer)适用于免疫组织化学与免疫印迹等实验中HRP标记抗体的稀释。稀释液中添加了抗体保护剂和稳定剂等成分,有效增加了稀释后HRP标记抗体的稳定性。用此稀释液稀释后的HRP标记抗体可在2-8℃稳定保存至少六个月。  
使用方法:  
按照一抗效价(或个人优化条件),将适量抗体加入抗体稀释液中即可。例如,效价为1:1000时,可将1ul抗体加入到1ml抗体稀释液中,充分混匀后即可使用。抗体现用现稀释,稀释后的抗体可2-8℃保存。  
注意事项:  
如需抗体回收再利用,建议在2-8℃进行抗体的结合反应,以减缓抗体效价的衰减速度。  
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。  
储存条件:  
-20℃保存,有效期为 2 年。短期可 2-8℃保存  
中文名称:冰冻切片抗原修复液  
英文名字:Quick Antigen Retrieal Solution for Cell Sections  
冰冻切片抗原修复液(Quick Antigen Retrieal Solution for Cell Sections)是一种特别适合用于冰冻切片的快速抗原修复液,只需室温孵育 5 分钟即可完成对冰冻切片样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。  
冰冻切片抗原修复液使用说明:  
1, 将冰冻切片用 PBS 洗涤 3 次,每次 5min。  
2, 将切片浸泡在抗原修复液中,室温孵育 5min。  
3, PBS 洗涤样本切片,重复 3 次,每次 5min。充分洗涤残留的 SDS,以免造成抗体失去活性。  
4, 封闭液封闭切片。  
5, 随后即可进行一抗孵育等后续的免疫染色步骤。  
中文名称:封闭绵羊血清(原液)  
英文名字:封闭绵羊血清(原液)  
产品介绍:  
封闭血清适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点,另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点,阻断抗体与样品中的Fc受体结合,从而降低背景,减少假阳性。在选择封闭血清时,要注意封闭用血清中不能含有目标蛋白,且与一抗来源不同,可用与二抗相同来源的封闭血清。  
 
 



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