上海莼试生物技术有限公司
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更新时间:2017-06-08 11:42:08浏览次数:260
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公司是*的ATCC细胞供应商,提供人EB病毒转化的B细胞;CGM1 的报价,咨询,称技术服务,咨询选购。
细胞名称 人EB病毒转化的B细胞;CGM1
形态特性 淋巴细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 EB转染B细胞
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10%
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。
2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。
3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
储存条件:18~25°C,避光防潮密闭干燥。
中文名称:亲和素树脂
英文名字:Immobilized Aidin Resin
特点:
Aidin coalently coupled to ~6% cross linked agarose. Minimal Leaching.Binding capacity 15~20 μg biotin/ml resin. For immunoprecipitation with biotinylated antibodies. Pull down assays with biotinylated proteins. Purification of biotinylated molecules, including:proteins, antibodies, DNA, carbohydrates.
说明:
Biotin, a 244 Da itamin (itamin H) molecule, exhibits an extraordinary binding affinity for aidin (Ka=1015 M-1 ). Biotin and aidin interaction is rapid and once the bond is established it can surie up to 3M guanidine-hydrochloride and extremes of pH. Biotin-aidin bonds can only be reersed by denaturing the aidin protein molecule with 8M guanidine-hydrochloride at pH1.5 or by boiling in SDS Page Sample Loading Buffer. Aidin is a glycoprotein with approximay 10% of its total mass coming from carbohydrates. Aidin has a molecular weight of 67 kDa and contains four identical 128 amino acid subunits that each has a single biotin binding domain. Aidin is a basic protein with an isoelectric pH of 10~10.5 and is readily soluble in aqueous buffers containing a wide range of salt, pH (2~11), temperature and other laboratory agents. This wide range of tolerance makes aidin suitable for a wide ariety of analytical applications. Aidin has extraordinary binding affinity for biotin (Ka=1015 M-1). The aidin in coalently coupled to the agarose resulting in minimal leaching and is stable oer pH2~11. The Aidin Resin is designed for the single step small and large scale affinity purification of proteins and antibodies with a biotin tag. The resin can also be used for immunoprecipitations using biotin labeled antibodies. Supplied as a 50% resin slurry.
用途及描述:科研试剂,蛋白纯化与层析
储存条件: 2~8°C
中文名称:咪唑
英文名字:Imidazole
分子式:C3H4N2 分子量:68.08
物理性状及指标:
水分:……………………≤0.2%
熔点:……………………87~91℃
灼烧残渣:………………≤0.1%
含量:……………………≥99%
用途及描述:科研试剂,适用于 pH 6.2-7.8 范围内的液体。
储存条件:18~25℃,避光防潮密闭干燥。
类别:免疫组化
中文名称:0.1%液消化液
英文名字:0.1% Trypsin Solution
产品描述
抗原修复用于甲醛固定的石蜡包埋组织切片。石蜡切片标本用甲醛固定,使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行免疫组化染色时,需要行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所 形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。 酶消化方法是常用的抗原修复方法之一,常用 0.1%和 0.4%液。一般 说来,消化能力较弱,主要用于细胞内抗原的消化,主要用于细 胞间抗原的消化。工作中要认真参照抗体说明书指示进行消化酶的选择,这样针对性更强,标记效果更理想。
产品优势
主要用于细胞内抗原的消化,本产品具有方便快速、稳定安全、细胞状态好等特点。
储存条件
-20℃
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
中文名称:AP标记抗体稀释液
英文名字:AP标记抗体稀释液
产品说明:
AP标记抗体稀释液(AP-Antibody Dilution Buffer)适用于免疫组织化学与免疫印迹等实验中AP标记抗体的稀释。稀释液中添加了抗体保护剂和稳定剂等成分,有效增加了稀释后AP标记抗体的稳定性。用此稀释液稀释后的AP标记抗体可在2-8℃稳定保存至少六个月。
使用方法:
按照一抗效价(或个人优化条件),将适量抗体加入抗体稀释液中即可。例如,效价为1:1000时,可将1ul抗体加入到1ml抗体稀释液中,充分混匀后即可使用。抗体现用现稀释,稀释后的抗体可2-8℃保存。