上海莼试生物技术有限公司

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SV40转染人成骨细胞;hFOB 1.19
SV40转染人成骨细胞;hFOB 1.19
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更新时间:2017-06-08 11:44:38浏览次数:390

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【简单介绍】
SV40转染人成骨细胞;hFOB 1.19 ,采用干冰保存运输收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

公司是*的ATCC细胞供应商,提供 SV40转染人成骨细胞;hFOB 1.19 的报价,咨询,称技术服务,咨询选购
细胞名称  SV40转染人成骨细胞;hFOB 1.19  
形态特性    
生长特性  贴壁生长  
特征特性   在0.6mg/mlG418存在下,用温度敏感的表达载体pUCSVisA58转染自然的胎儿四肢组织,建立了此细胞系。 在许可温度33.5oC下细胞分裂很快,而在限制温度39.5oC下细胞极少分裂或不分裂。 这些细胞具有分化为表达造骨细胞表型的成熟造骨细胞的能力。 这些细胞提供了一个同质化的快速增殖模型系统,用于研究正常人造骨细胞的分化,造骨细胞生理和激素,生长因子,和对造骨细胞的功能及分化有影响的细胞因子。   
培养条件   DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium)  优质胎牛血清,10%;0.3mg/ml G418  
传代方法   消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。  
传代情况  PN5  
冻存条件   *培养基+8%DMSO  
支原体检测  阴性   
STR    
同工酶    
染色体    
  使用权限  A类培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。

2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。

3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。

4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
酯、酮)、碱性和中性含氮化合物、硫醇。用途广泛的非离子表面活性剂,在温和的变性条件下用于恢复膜组分。  
  储存条件:18~25°C,避光防潮密闭干燥。  
中文名称:曲拉通X-405  
英文名字:Triton X-405  
分子式:(C2H4O)n.C14H22O  分子量:294.43  
物理性状及指标:  
外观:……………………无色至淡黄色液体  
溶解性:…………………溶于水  
密度:……………………1.096 g/mL at 25 °C  
细胞培养测试:…………合格  
用途及描述:科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面。曲拉通是一种非离子性、非变性的去垢剂,适用于膜蛋白复合体的增溶、分离和提纯以及凝胶电泳  
储存条件:室温,避光防潮密闭干燥。  
中文名称:树脂  
英文名字:Immobilized Biotin Resin  
特点:  
Strong affinity for aidin, streptaidin and neutraidin. Reusable resin, at least 10 times.Coalently coupled to limit leaching. Spacer arm:9. For isolatin of aidin, streptaidin and neutraidin coupled molecules. Immunoprecipitations with aidin, streptaidin and neutraidin coupled antibodies.  
说明:  
Immobilized Biotin Resin is designed for the high affinity chromatography purifications of aidin, streptaidin and neutraidin protein. The resin consists of biotin coupled to 6% cross-linked agarose. Biotin, a 244 Da itamin (itamin H) molecule, exhibits an extraordinary binding affinity for aidin (Ka=1015 M-1) and streptaidin. Biotin and aidin interaction is rapid and once the bond is established it can surie up to 3M guanidine-hydrochloride and extremes of pH. Biotin-aidin bonds can only be reersed by denaturing the aidin protein molecule with 8M guanidine-hydrochloride at pH1.5 or by boiling in SDS-PAGE sample loading buffer.  
用途及描述:科研试剂,蛋白纯化与层析  
储存条件: 2~8°C  
中文名称:盐酸胍  
英文名字:Guanidine hydrochloride  
分子式:CH5N3.HCl    分子量:95.53  
物理性状及指标:  
外观:………………………………白色结晶性粉末  
熔点:………………………………187-190℃  
溶解性:……………………………易溶于水和乙醇  
RNase,DNase,蛋白酶:…………不含  
炽灼残渣:…………………………<0.1%  
纯度:………………………………>99%  
pH(5%水, 25°C)………………4.5~6.0  
干燥失重:…………………………< 0.05%  
用途及描述:科研试剂,广泛应用于分子生物学。强离液剂,用以变性和复性蛋白质。这种强劲的变性剂可以溶解不溶或变性的蛋白,如包涵体。这被用来作为复性到蛋白质或酶复性到活性状态的*步。  
储存条件:18~25°C,避光防潮密闭干燥。  
中文名称:  
英文名字:Kallikrein  
物理性状及指标:  
外观:……………………冻干粉  
样物质:………<0.05  
脂肪:……………………<0.1%  
激酶:……………………<0.8  
炽灼残留:………………<3%  
干燥失重:………………<0.2%  
用途及描述:科研试剂  
储存条件:2~8°C避光防潮密闭干燥。  
中文名称:乙二胺四乙酸铁钠盐;EDTA铁钠水合物  
英文名字:EDTA, Iron (III), sodium salt  
中文名称:杂交液 I  
 



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