上海莼试生物技术有限公司

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人肝永生化细胞;THLE-3
人肝永生化细胞;THLE-3
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更新时间:2017-06-08 11:47:33浏览次数:384

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【简单介绍】
人肝永生化细胞;THLE-3 收到细胞后7天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时销售人员,我们将尽快为您解决。

公司是*的ATCC细胞供应商,提供人肝永生化细胞;THLE-3 的报价,咨询,称技术服务,咨询选购
细胞名称  人肝永生化细胞;THLE-3  
形态特性   上皮细胞  
生长特性  贴壁生长  
特征特性   THLE-2 (ATCC CRL-10149 和 THLE-3 (ATCC CRL-11233)细胞系是正常肝细胞用SV40大T抗原转染得到。 将含有SV40 T抗原的Bgl I-Hpa I片段的逆转录病毒载体导入兼嗜性包装细胞株PA317中病毒。 THLE-2 and THLE-3表达正常成人肝上皮细胞特征性的表型。 当注射到无胸腺裸鼠中时,它们不成瘤,具有接近二倍体的核型,不表达甲胎蛋白。 THLE-2 and THLE-3将benzo[a]pyrene, N-nitrosodimet   
培养条件    Clonetics Corporation, Walkersville, MD 21793的BEGM培养基(目录号CC3170)。 套装包含了500毫升基本培养基及分别冻存的添加剂,我们不用其中的GA和Epinephrine但另外添加了5 ng/ml EGF, 70 ng/ml Phosphoethanolamine。  
传代方法   消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。  
传代情况  PN5  
冻存条件   *培养基+8%DMSO  
支原体检测  阴性   
STR    
同工酶    
染色体    
使用权限  A类培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。

2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。

3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。

4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
物理性状及指标:  
外观:……………………白色粉末  
溶解性:…………………溶于DMF(50 mg/ml).  
炽灼残留:………………<0.1%,  
水分:……………………<10%  
纯度:……………………>98%  
用途及描述:科研试剂  
储存条件:-15~-20°C避光防潮密闭干燥。  
中文名称:6 x RNA Loading Dye  
英文名字:6 x RNA Loading Dye  
物理性状及指标:  
组分:10 mmol/L Tris-HCl,60 mmol/L EDTA,15%蔗糖,pH 7.6,0.05%溴蓝,0.05%二甲苯青FF  
用途及描述:科研试剂,电泳上样  
储存条件:4°C避光防潮密闭干燥。  
中文名称:CDI活化琼脂糖  
英文名字:CDI Amine Reactie Agarose  
说明:  
CDI Amine Reactie Agarose consists of 6% cross-linked agarose actiated with CDI (1,1’-carbonyl diimidazole) to form reactie imidazole carbamates. The actiation of the resin occurs in solent and to maintain its actiity. The resin is supplied in acetone to preent hydrolysis. Upon reaction of the resin with primary amine containing molecules, i.e. proteins, in basic (pH8.5~10) aqueous buffers, the imidazole carbamates lose the imidazole group and form carbamate linkages. CDI Amine Reactie Agarose is ideal for immobilizing peptides, small organic molecules and certain proteins and reactions can occur in organic solent making it ideal for water-insoluble ligands.Features:Proen coupling chemistry, Easy to use, no secondary coupling agents required, Stable linkages, Couple in inorganic buffers for insoluble molecules. Suitable for Couple proteins and peptides. Couple primary amine containing ligands.  
用途及描述:科研试剂,蛋白标记与偶联  
储存条件: 2~8°C  
中文名称:Con A琼脂糖  
英文名字:Concanaalin A (Con A) Agarose  
特点:  
Binds α-D-mannopyranosyl, α-D-glucopyranosyl and sterically related residues. Purification or enrichment of glycoproteins, polysaccharides and glycolipids. Ligand Density:10~16 mg Con A/ml resin. Capacity:20~50 mg thyroglobulin/ml resin. Bead structure:4% agarose. For purification/ enrichment of glycoproteins, polysaccharides and glycolipids.  
说明:  
Concanaalin A (Con A) Agarose consists of Con A coupled to 4% agarose by the cyanogen bromide method. Con A is a tetrameric metalloprotein lectin isolated from Canaalia ensiformis (jack bean). Con A is used for the purification of glycoproteins, polysaccharides and glycolipids as it binds molecules containing α- D-mannopyranosyl, α-D-glucopyranosyl and sterically related residues. Con A agarose has also be used in other application areas including purification of enzyme-antibody conjugates, purification of IgM and separation of membrane esicles. As stated aboe, Con A is a metalloprotein and to maintain its binding characteristics the presence of both Mn2+ and Ca2+ is essential. Each subunit of Con A utilizes one calcium and one manganese ion and these cations can be remoed under acidic conditions abolishing the carbohydrate-binding actiity.  
用途及描述:科研试剂,蛋白纯化与层析  
储存条件: 2~8°C  
中文名称:DNA Natie E.coli  
英文名字:DNA Natie E.coli  
物理性状及指标:  
外观:……………………冻干粉  
增色效应:………………>27%  
用途及描述:科研试剂  
储存条件: 2~8°C  
中文名称:DNA组织样品常温保存液  
英文名字:DNA-EZ Reagents F DNA-Be-Locked A  
特点:1. High efficiency. Immediate stabilization of harested tissues. 2. Conenient. No need for liquid nitrogen or dry ice. 3. Stability. Long-term storage of tissue for later analysis.  
简介:DNA-Be-Locked (Tissue) proides immediate stabilization of DNA in tissue samples at room temperature. This preseres the in io profile of DNA, allowing reliable downstream analysis. Stabilized tissues can be transported at 15-25°C for up to 7 days, or stored at 2-8°C for up to 1 year. For longer storage, stabilized tissues can be archied at -20°C or -80°C.  
用途及描述:科研试剂  
储存条件:室温,避光防潮密闭干燥。  
 



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