上海莼试生物技术有限公司
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更新时间:2017-06-09 09:22:58浏览次数:291
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细胞名称 人肺癌细胞系;A549/EML4-ALK
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞属保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 10%FBS
传代方法 无
传代情况 1:3传代,3-4天传1次
冻存条件 C5
支原体检测 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
STR 阴性
同工酶
染色体 未做人肺癌细胞系;A549/EML4-ALK
实验方法和步骤
(一) 前处理 用台称称量青蛙或蟾蜍的体重,然后按10微克/克动物体重的剂量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小时后,将动物处死,用剪刀剪开皮肤和肌肉,取出大腿骨和胫骨,剔净股骨上的肌肉,然后用一小块纱布来回搓干净。剪开两端股骨,用注射器(内装5ml 1% 柠檬酸钠溶液)缓慢冲洗骨髓细胞到离心管中,经平衡后离心8分钟,速度为1000转/分钟。
(三) 低渗 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管冲匀沉淀物,在恒温水浴(28℃)处理20分钟或更长一点时间。
(四) 固定 低渗后,以每分钟1000转速度离心10分钟。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,冲散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 冲匀后静止固定20分钟。重复固定1~2次,离心的速度与时间以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,冲匀沉淀物。从冰箱取出预先冷冻的载片,每片滴3滴细胞悬液,立即用嘴向载片上吹气,使细胞均匀分散,在酒精灯火焰上来回烤一下,以助染色体更好分散和展开。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分钟(Giemsa原液用PH=6.8磷酸缓冲液稀释),然后用水冲洗,片干后镜检。 (七) 镜检 在中倍镜下找染色体分散好的中期分裂相,转至高倍镜详细观察两栖类染色体的数目,属于大、中、小染色体各有多少条。
注意事项:
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们。
2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
人apelin 12(AP12)ELISA Ki Human apelin 12, AP12 Elisa Kit 96T/48T
人葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)elisa试剂盒 Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide, GIP Elisa Kit 96T/48T
人胰岛素原(PI)elisa试剂盒 Human Proinsulin, PI Elisa Kit 96T/48T
人胰岛素受体β(ISR-β)elisa试剂盒 Human Insulin Receptor β, ISR-β Elisa Kit 96T/48T
人糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)elisa试剂盒 Human Glycated hemoglobin A1c, GHbA1c Elisa Kit 96T/48T
人胰高血糖素样肽1(GLP-1)elisa试剂盒 Human ghcagons-like pepfide 1, GLP-1 Elisa Kit 96T/48T
人甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)elisa试剂盒 human thyroid stimulating immunoglobulin, TSI Elisa Kit 96T/48T
人甲状旁腺激素(PTH)elisa试剂盒 human Parathyroid hormone, PTH Elisa Kit 96T/48T
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)elisa试剂盒 human Prostaglandin D2-methoxime, PGD2-MOX Elisa Kit 96T/48T
人高敏甲状腺素(u-T4)elisa试剂盒 human Ultrasensitivity Thyroxine, u-T4 Elisa Kit 96T/48T
人高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)elisa试剂盒 human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone, U-TSH Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺(DA)elisa试剂盒 human dopamine, DA Elisa Kit 96T/48T
人(AZT)elisa试剂盒 human Azidothymidine, AZT Elisa Kit 96T/48T
人促肾上腺皮质激素(ACTH)elisa试剂盒 human adrencocorticotropic hormone, ACTH Elisa Kit 96T/48T
人促肾上皮质激素释放激素(CRH)elisa试剂盒 human corticotropin releasing hormone, CRH Elisa Kit 96T/48T
人甲状腺球蛋白(TG)elisa试剂盒 Human Thyroglobulin, TG Elisa Kit 96T/48T
人真核翻译起始因子3a(eIF3a)elisa试剂盒 Human Eukaryotic translation initiation factor 3a, eIF3a Elisa Kit 96T/48T
人磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)elisa试剂盒 Human phospho-extracellular signal-regulated kinase, pERK Elisa Kit 96T/48T
人受磷蛋白(PLN)elisa试剂盒 Human phospholamban, PLN Elisa Kit 96T/48T
人肿瘤坏死因子相关弱凋亡诱导因子(TWEAK)elisa试剂盒 Human tumour necrosis factor related weak inducer of apoptosis, TWEAK Elisa Kit 96T/48T
人IPO-38蛋白(IPO38)elisa试剂盒 Human IPO-38 Elisa Kit 96T/48T
人切除修复交叉互补基因1(ERCC1)elisa试剂盒 human excision repair cross-complementation group 1, ERCC1 Elisa Kit 96T/48T
人羰基化蛋白(PC)elisa试剂盒 Human Protein Carbonyl, PC Elisa Kit 96T/48T
人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)elisa试剂盒 human phospho-inhibitory subunit of NF-κBα, pIKBα Elisa Kit 96T/48T
人桩蛋白(Pax)elisa试剂盒 Human paxillin, Pax Elisa Kit 96T/48T
人小表皮粘蛋白(SBEM)elisa试剂盒 Human small breast epithelial mucin, SBEM Elisa Kit 96T/48T
人类似60S核糖体蛋白L21(LOC382344)elisa试剂盒 human Mus musculus similar to 60S ribosomal protein L12, LOC382344 Elisa Kit 96T/48T