上海莼试生物技术有限公司

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人结直肠腺癌细胞;HT-29
人结直肠腺癌细胞;HT-29
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更新时间:2017-06-09 09:26:09浏览次数:243

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【简单介绍】
人结直肠腺癌细胞;HT-29
,采用干冰保存运输收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。

公司是*的ATCC细胞供应商,提供人结直肠腺癌细胞;HT-29
的报价,咨询,称技术服务,咨询选购
细胞名称 人结直肠腺癌细胞;HT-29
形态特性  上皮样;多角
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是1964年由Fogh J用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的。近来,已建株的培养细胞用含血清的McCoy's 5a培养基培养。 该细胞系在裸鼠中成瘤,也能在类固醇处理的地鼠中成瘤。该细胞可合成IgA、CEA、TGFβ结合蛋白和黏液素;表达受体,但没有检测到血浆酶原活性;不表达CD4,但细胞表面表达半乳糖神经酰胺(HIV的可能替代受体)。该细胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性;p53基因过表达,并且在273位密码子处发
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
传代方法  1:3传代;3-4天一次
传代情况 不详
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR  Amelogenin:X;D8S1179:10, 16;D21S11:29,30;D7S820:10;CSF1PO:11, 12;D3S1358:15, 17;TH01:6, 9;D13S317:11, 12;D16S539:11, 12;D2S1338:19, 23;D19S433:14;vWA:17, 19;THOX:8, 9;D18S51:13;D5S818:11, 12;FGA:20, 22。
同工酶
染色体  68-72

使用权限 A类培养需要满足以下条件
1、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。

2、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。

3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。

4、气体环境:培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。
人多免疫球蛋白受体(poly-IgR)elisa试剂盒 polyimmunoglobulinreceptor, poly-IgR Elisa Kit 96T/48T
人血红蛋白晚期糖基化终末产物(Hb-AGE)elisa试剂盒 Human hemoglobin-advanced glycosylation end products, Hb-AGE Elisa Kit 96T/48T
人表免疫球蛋白A(mIgA)elisa试剂盒 Human membrane IgA, mIgA Elisa Kit 96T/48T
j链(Ig-j)elisa试剂盒 Human immunoglubin joining chain, Ig-j Elisa Kit 96T/48T
人血红蛋白β亚基(HB-β)elisa试剂盒 Human β-subunits of hemoglobin, HB-β Elisa Kit  96T/48T
人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)elisa试剂盒 Human secretory immunoglobulin A, SIgA Elisa Kit  96T/48T
人活化Ⅻ(FⅫa)elisa试剂盒 Human activated coagulation factor Ⅻ, FⅫa Elisa Kit 96T/48T
人游离蛋白S(FP-S)elisa试剂盒 Human Free Protein S, FP-S Elisa Kit 96T/48T
人异常原(APT)elisa试剂盒 Human Abnormal prothrombin, APT Elisa Kit 96T/48T
人循环免疫复合物(CIC)elisa试剂盒 Human circulating immune complex, CIC Elisa Kit 96T/48T
人血小板相关抗体IgM(PA-IgM)elisa试剂盒 Human Plaet associated antibody, PA-IgM Elisa Kit 96T/48T
人血纤肽/纤维蛋白肽A(FPA)elisa试剂盒 Human fibrinopeptide A, FPA Elisa Kit 96T/48T
人纤溶酶原(Plg)elisa试剂盒 Human Plasminogen, Plg Elisa Kit 96T/48T
人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)elisa试剂盒 Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4, CTLA-4 Elisa Kit 96T/48T

轻链lambda(λ-IgLC)elisa试剂盒 Human lambda immunoglobulin light chain, λ-IgLC Elisa Kit 96T/48T
人肽-主要组织相容性复合体复合物(pMHC)elisa试剂盒 Human peptide major histocompatibility complex, pMHC Elisa Kit 96T/48T
人皮肤淋巴细胞相关抗原(CLA)elisa试剂盒 Human cutaneous lymphocyte-associated antigen, CLA Elisa Kit 96T/48T
人血栓调节蛋白复合物(T-TM)elisa试剂盒 Human thrombinthrombomodulin compound, T-TM Elisa Kit 96T/48T
人溶血补体(Hc)elisa试剂盒 Human Hemolytic complement, Hc Elisa Kit 96T/48T
人T细胞受体(TCR)elisa试剂盒 Human T cell receptor, TCR Elisa Kit 96T/48T
人狼疮抗凝抗体(LAC/LA)elisa试剂盒 Human lupus anticoagulant, LAC/LA Elisa Kit 96T/48T
人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)elisa试剂盒 Human soluble fibrin monomer complex, SFMC Elisa Kit 96T/48T
人血清白蛋白(HSA)elisa试剂盒 Human sreum albumin, HSA Elisa Kit 96T/48T
人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)elisa试剂盒 Human 2, 3-dinor thromboxane B2, 2, 3-dinor-TXB2 Elisa Kit 96T/48T
人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa试剂盒 Human 11-dehydro-thromboxane B2, 11-DH-TXB2 Elisa Kit 96T/48T
人血栓调节蛋白(TM)elisa试剂盒 Human thrombomodulin, TM Elisa Kit  96T/48T
人纤溶抑制因子/激活的纤溶抑制物(TAFI)elisa试剂盒 Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor, TAFI Elisa Kit 96T/48T
人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)elisa试剂盒 Human plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa, GP-ⅡbⅢa Elisa Kit 96T/48T
人血小板反应蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)elisa试剂盒 Human thrombospondin 1, TSP-1 Elisa Kit 96T/48T



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