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参数规格：
产品名称：PMI基因PCR检测试剂盒
产品货号：CP100218
产品规格：48T  0.1PCR管/48T   0.2PCR管
产品分类：PCR-荧光探针法
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1（10pM）               2μl
      引物2（10PM）              2μl
      Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
使用方法：
一、样品DNA的制备
用自选方法提取细菌样品DNA。注意：DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA，后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线（以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL超纯水（用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或超纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL，建议每次稀释10倍，梯度稀释至10E7拷贝/μL）。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头，从6号管中取5 μL溶液到5号管中，充分震荡1分钟，得10E5拷贝/μL的阳性对照。
6. 换枪头，从5号管中取5 μL溶液到4号管中，重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR（见下步），每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
好食脉孢菌酶2抗体Human HARS(Histidyl-tRNA synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit人蛋白磷酸酶1调控/抑制因子亚基1A(PPP1R1A)免疫试剂盒

酿酒酵母碳水化合物磺基转移酶10抗体Human IKBKE(Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit epsilon) ELISA Kit人蛋白磷酸酶自身抗体免疫试剂盒

黄疣伦茨氏菌碳水化合物磺基转移酶11抗体Human PKD2(Polycystin-2) ELISA Kit人蛋白磷酸酶1B(PTP1B)免疫试剂盒

植物乳杆菌碳水化合物磺基转移酶12抗体Human IFIT1(Interferon-induced protein with tetRatricopeptide repeats 1) ELISA Kit人蛋白聚糖4(PRG4)免疫试剂盒

叶点霉属碳水化合物磺基转移酶13抗体Human ICAM-4(Intercellular adhesion molecule 4) ELISA Kit人蛋白脱亚氨酶4(PADI4)免疫试剂盒

鸡冠蘑碳水化合物磺基转移酶14抗体Human SDCBP(Syntenin-1) ELISA Kit人蛋白甲基转移酶1(PRMT1)免疫试剂盒

酿酒酵母碳水化合物磺基转移酶2抗体Human ICAM-4(Intercellular adhesion molecule 4) ELISA Kit人蛋白激酶C(PKC)免疫试剂盒

三叶草根瘤菌碳水化合物磺基转移酶3抗体Human PKD2(Polycystin-2) ELISA Kit人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)免疫试剂盒

猴假单胞菌碳水化合物磺基转移酶5抗体Human LOXL2(Lysyl oxidase homolog 2) ELISA Kit人蛋白激酶B(PKB)免疫试剂盒

意大利果壳叶点霉碳水化合物磺基转移酶6抗体Human FMOD(Fibromodulin) ELISA Kit人蛋白基因产物9.5(PGP 9.5)免疫试剂盒

卵形丝孢酵母染色质修饰蛋白CHMP7抗体Human FAM132B(Protein FAM132B) ELISA Kit人蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)免疫试剂盒

纯白环菇软骨凝集蛋白CHODL抗体Human DTNBP1(Dysbindin) ELISA Kit人蛋白S(Protein S)免疫试剂盒

栗酒裂殖酵母胆囊收缩素39抗体Human ZEB1(Zinc finger E-box-binding homeobox 1) ELISA Kit人蛋白C(PC)免疫试剂盒

拟卵盖鹅膏菌乙激酶α抗体Human EBLN1(Endogenous Bornavirus-like nucleoprotein 1) ELISA Kit人蛋白ATP1B4(ATP1B4)免疫试剂盒

库尔勒海洋杆菌阳离子通道相关蛋白4抗体Human SORD(Sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit人蛋白(肽酰脯氨酰顺/反异构酶)NIMA结合1(PIN1)免疫试剂盒

黑曲霉胞浆动力蛋白中间链1抗体Human MTOR(Serine/threonine-protein kinase mTOR) ELISA Kit人蛋白 DJ-1(PARK7)免疫试剂盒
PMI基因PCR检测试剂盒地中海马特尔氏菌Martelella│mediterranea 质量规格：>98%,BRPC4,SFRS1互动蛋白1试剂盒邻甲氧基肉桂酸

侧柄褐孔菌Fuscoporia│discipes 质量规格：BRP53抗体elisa试剂盒雷帕霉素

新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 质量规格：铋含量：>56%,BRP2蛋白抗体试剂盒克班宁

鸭瘟立默氏菌Riemerella│anatipestifer 质量规格：>99%,BRP2蛋白抗体试剂盒苦龙胆酯苷

芽孢杆菌属菌种Bacillus│T. 质量规格：>98%，植物激素级P27蛋白试剂盒康普瑞汀磷酸二钠

酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格：BRP0蛋白抗体试剂盒康普瑞汀

黑曲霉Aspergillus│niger 质量规格：Ind GradeP0蛋白抗体试剂盒卡枯

短杆菌Brevibacterium│sp. 质量规格：BS GradeOJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体试剂盒柯伊利素-7-O-葡萄糖苷

猪丹毒丝菌Erysipelothrix│rhuriopathiae 质量规格：>80%,Ind GradeN-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-试剂盒柯诺辛B