上海邦景实业有限公司
主营产品: 进口elisa试剂盒,细胞株,细胞系,菌种 |
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参考价 | 面议 |
- 型号 50次
- 品牌 其他品牌
- 厂商性质 经销商
- 所在地 上海市
更新时间:2021-04-02 13:48:50浏览次数:171
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服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 猪内源性逆转录病毒RT-LAMP试剂盒 |
英文名称 | RT-LAMP kit for porcine endogenous retrovirus |
货号 | BJ-P98770 |
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
服务流程:
1、根据客户提供的基因序列设计特异性引物和荧光探针(染料法只需设计引物)
2、抽提DNA、RNA,并对RNA进行逆转录
3、实时荧光定量PCR
4、提供完整的实验结果报告(检测数据、溶解曲线、扩增曲线)
5、返还样品(引物、RNA和cDNA)
使用方法:
一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品 DNA 的制备
7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。
IGFBP7 Others Human IGFBP7 / IBP-7 细胞裂解液 (阳性对照) 柠檬酸莫沙必利酰胺Mosapride Citric Amide质量规格:美国进口
MA-891 小鼠癌高转移细胞去-4-氟代苄基莫沙必利Des-4-fluorobenzyl Mosapride质量规格:美国进口
BT-474 [BT474]导管癌细胞 BT-474 [BT474] human breast ductal carcinoma cells 1640+10% FBS8-(4-氯化苯基硫代)腺嘌呤8-(4-Chlorophenylthio)adenine质量规格:美国进口
VSTM1 Protein Human 重组 VSTM1 蛋白 (Fc 标签)β-腺嘌呤二核苷酸 3'-1酸钠盐水合物β-Nicotinamide adenine dinucleotide 3'-phosphate salt hydrate质量规格:美国进口
胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞;HFTF 肺大动脉平滑肌细胞*培养基 100mL腺嘌呤盐酸盐Adenine 质量规格:美国进口
SK-BR-3(癌细胞) 5×106cells/瓶×2雷诺嗪-d3质量规格:美国进口Ranolazine-d3
HUAEC-c 脐动脉内皮细胞(HUAEC) 500,000cells 肠静脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)雷诺嗪质量规格:美国进口Ranolazine
原代神经元细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml去甲基雷诺嗪β-D-葡萄糖苷酸质量规格:美国进口Desmethyl Ranolazine β-D-Glucuronide
SEMA4D Others Cynomolgus 食蟹猴 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 细胞裂解液 (阳性对照) (R)-盐酸乐卡地平质量规格:美国进口(R)-Lercanidipine
EB病毒转化的B细胞;KMY0926(标准品)质量规格:含量测定Troxipide
猪内源性逆转录病毒RT-LAMP试剂盒结直肠腺癌细胞;HCT 116 [HCT116]二录化铜,英文名或英文缩写:Copric chloride dihydrate,级别:CP,98.5%,规格:1克
成纤维母细胞-胎儿(HDF-f)( 5×105 )溴化鳞(III) tribromidq 7789-60-8
RN-s, 大鼠纹状体神经元录雷他定 Lorctcdinq; 79794-72-2
T瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77 大鼠肾成纤维细胞*培养基 100mLCASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制剂 VII5MGCLD PL-COLD
P815 小鼠肥大细胞癌细胞N-芴甲氧羰酰基-D-蛋酸(甲)NA
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。