公司产品仅供科研研究实验！

PCR具有以下特点：

灵敏：配合推荐使用的核酸抽提方案，检测灵敏度达到 10CFU/ml。

可靠：抽提加入内标核酸，全过程质量控制。

稳定：全程闭管操作，无交叉污染。

方便：操作简单，无需电泳步骤。特点

1. 内控对照为独立包装，遵循欧洲药典和日本药典操作流程。

2. 高特异性，一次检测即可涵盖所有常见易感染细胞的支原体物种（包括欧洲药典规定的9种支原体）。与细菌和真核DNA无交叉反应。

3. 高灵敏度，检测限可达到≤10CFU/ml。

4. 有相应配套的支原体基因组DNA和细菌基因组DNA，便于特异性验证。

5. 有相应配套的支原体定量标准品，便于最后定量检测。

操作流程:

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

操作步骤：

第1步：样本处理

a.细胞培养上清

说明：

①样品基质可能会影响检测的灵敏度。收集和筛选更高的样品量可提高测定灵敏度。

②细胞培养物样本含丰富的DNA酶，在低温下也能降解支原DNA，影响检测灵敏度。

建议：样本做DNA抽提处理，实现灵敏度。

第2步：试剂制备

a. 冻干粉溶解

b. 反应体系制备 b1) 样品为细胞上清筛查——反应体系制备

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